ゴナドトロピンレセプターの発現調節

促性腺激素受体表达的调节

• 批准号: 07671766
• 负责人: 峯岸 敬
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671766/
• 关键词: ラット顆粒膜細胞; アクチビン; FSHレセプター; CHO細胞; カルシウム; cAMP

ラット卵巣顆粒膜細胞培養系を用いアクチビンがFSH, LH/hCGレセプターmRNAを誘導することを示したが、mRNAの半減期、mRNA合成に対する検討を行う必要があり、同一の培養系を用いて行った。半減期においては、アクチノマイシンDを作用させmRNA合成を抑制し、経時的にmRNAの減少率を計測した。アクチビンはFSHレセプターmRNAの半減期を延長したが、cAMPによってはこの半減期を延長は観察されなかった。合成に関しては、培養細胞より核を抽出し、^<32>Pラベルの塩基と共にインキュベーションし新たに合成されたmRNAの測定(run on assay)を行った。run on assayの結果から、アクチビン、cAMP共にFSHレセプターの転写のレベルで促進的に働いている事が明らかになった。cAMPは細胞に添加後2時間で最高でコントロールの1.5倍となり、アクチビンは、添加後6時間でコントロールの3倍まで上昇した。この結果は、アクチビン、cAMP共にFSHレセプターmRNAの上昇を促進するが、アクチビンの作用は、転写, mRNAの安定性の両方に作用して、強力な効果を示すことが判明した。我々はヒトFSHレセプターcDNAを発現ベクターに入れてCHO細胞に導入した細胞を確立したので、この細胞にフュラII処理しFSH投与で細胞内カルシウムの変動を測定した。FSH添加後非常に速やかに細胞内カルシウムの上昇が観察された。FSHは、その作用をcAMPにより伝達されていると考えられていたが、同時に細胞内のカルシウムを介しての情報伝達の経路を持つ事が示された。

It is necessary to use the same culture system to study the induction of FSH, LH/hCG mRNA, mRNA half-life and mRNA synthesis. mRNA synthesis was inhibited at half-time and mRNA reduction was measured at half-time. The half-life of FSH mRNA was prolonged, and the half-life of cAMP mRNA was prolonged. Synthesis <32>related to cell culture, nuclear extraction, gene expression and gene synthesis (run on assay) The results of run on assay are as follows: cAMP was 1.5 times as high 2 days after addition and 3 times higher 6 days after addition. The results showed that the expression of FSH mRNA was enhanced by cAMP, the expression of FSH mRNA was enhanced by cAMP, and the stability of FSH mRNA was enhanced by cAMP. The expression of FSH cDNA was detected in CHO cells, and the expression of FSH in CHO cells was determined. After FSH was added, the intracellular concentration increased rapidly. FSH and cAMP are involved in the transmission of cAMP and in the transmission of information in cells.

项目成果

峯岸 敬: "家族性思春期早発症とLH/hCGレセプター" Molecular Medicine. 31. 1208-1212 (1994)

Takashi Minegishi：“家族性性早熟和 LH/hCG 受体”《分子医学》31. 1208-1212 (1994)。

峯岸 敬: "排卵障害とinhibin, activin" 臨床婦人科産科. 49. 1478-1480 (1995)

Takashi Minegishi：“排卵障碍和抑制素、激活素”《临床妇产科》49。1478-1480（1995）。

S. Karino et al.: "Regulation and localization of midkine in rat ovary" FEBS Letters. 362. 147-150 (1995)

S. Karino 等人：“大鼠卵巢中中期因子的调节和定位”FEBS Letters。

M. Tano et al.: "Regulation og follstatin mRNA in caltured rat granulosa cells" Molecular and Cellular Endocrinology. 109. 167-174 (1995)

M. Tano 等人：“培养大鼠颗粒细胞中卵泡抑素 mRNA 的调节”分子和细胞内分泌学。

T. Minegishi et al.: "Regulation of FSH receptor mRNA levels in cultared rat granulosa cells" Molecular and Cellular Endocrinology. 108. 67-73 (1995)

T. Minegishi 等人：“培养的大鼠颗粒细胞中 FSH 受体 mRNA 水平的调节”分子和细胞内分泌学。