Ca流入促進物質(CIF)の同定並びにその受容体Caチャンネルの構造と機能の解析

Ca内流启动子(CIF)的鉴定及其受体Ca通道的结构和功能分析

• 批准号: 07672017
• 负责人: 森田 克也
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672017/
• 关键词: 受容体Ca^<2+>チャンネル(ROC)機構; Ca^<2+>流入促進物質(CIF); 好中球; 顎下腺細胞; 副腎クロマフィン細胞; ROC機構阻害薬; 活性調節機構

炎症・免疫関連細胞や唾液腺等の非興奮性細胞では、受容体Ca^<2+>チャンネル(ROC)機構が発達しており、細胞外Ca^<2+>の流入がその活性化に重要な役割を果たしている。このROC機構に関しては、最近枯渇したCa^<2+>プールからCa^<2+>流入促進物質(Ca^<2+>-influx factor: CIF)が遊離されCa^<2+>流入を刺激することが報告され、注目を集めたが実体は不明である。ROC機構を選択的に阻害する薬物は新しいタイプのアレルギー・免疫疾患等の治療薬としての可能性が期待されるが、現在まだ知られていない。本研究はCIFおよびCIF結合蛋白質の同定、ROC機構の解明とその特異的阻害薬の開発を目的として、好中球、顎下腺細胞、副腎クロマフィン細胞を用いて検索し、以下の成績を得た。1.血小板活性化因子(PAF)或いはthapsigarginでCa^<2+>プールを枯渇した好中球よりCa^<2+>流入活性を有する物質(CIF)を抽出し、TLCにて部分精製を達成した。CIFは上記3種の細胞全てで同程度のCa^<2+>流入を引き起こした。無処置細胞抽出液中にはCIF活性は認められなかった。2.CIFによるCa^<2+>の流入はprotein kinase Cにより抑制的に調節されていることを認めた。受容体刺激によるCa^<2+>流入は好中球ではtyrosine kinase阻害剤、顎下腺細胞ではguanylate cyclase阻害剤で抑制されたがクロマフィン細胞では影響を与えなかった。3.Econazol,SK&F 96365及びプリン誘導体がCIFによるCa^<2+>流入を抑制し、組織により薬物感受性が異ことを認めた。更に或る種のホルモン誘導体がROC機構を特異的に阻害することを見出した。4.ROC阻害作用を有する薬物はアセチルコリン誘発ムチン分泌(顎下腺細胞)およびカテコールアミン分泌(クロマフィン細胞)を共に抑制した。これらの成績は、ROC機構の情報伝達物質としてCIFがCa^<2+>流入を引き起こし、非興奮性細胞のみならず興奮性細胞においても細胞活性化に重要な役割を果たしている可能性、更にROC機構は組織により差異が存在する可能性を示唆している。加えて阻害薬物の感受性が異なることから、組織選択制の高い新しいタイプの医薬品開発の可能性を示した。又、CIFの同定に時間を要しており、ROC機構の実体の解明は困難であった。なおこの点については今後に残された課題であり、現在更に研究を押し進めている。

Inflammation and immune-related cells, non-excitable cells such as salivary glands, receptor Ca^<2+> receptor (ROC) ) The mechanism of the activation of the influx of extracellular Ca^<2+> is important.このROC mechanism に关しては、 Recently dry 渇したCa^<2+>プールからCa^<2+> influx promotion substance (Ca^<2+>-influx factor: CIF)がfreeされCa^<2+>inflowをstimulationすることがreportされ, focusing on the collectionめたが実体はunknownである. The ROC organization's selection of prevention and control measures and immune diseases Suffering from waiting for treatment, waiting for the possibility of treatment, looking forward to it, and knowing it now. In this study, the identification of CIF-binding proteins, the elucidation of the ROC mechanism, and the identification of specific inhibitory effects on CIF were clarified. The following results were obtained using the として, good medium, submandibular gland cells, and accessory renal クロマフィン cells. 1. Platelet Activating Factor (PAF) or Platelet Activating Factor (PAF) or Platelet Activating Factor (CIF), TLC Partial Refining and Refining. CIF shows that all three types of cells have the same degree of Ca^<2+> flowing into them. The CIF activity in the untreated cell extract was determined. 2. CIF regulates the influx of Ca^<2+> and regulates the inhibition of protein kinase C. The receptor stimulates the influx of Ca^<2+> into the good ball, tyrosine kinase inhibitor, and submandibular gland cells and guanylate The cyclase inhibitor inhibits and inhibits the action of cyclase on cells and affects the function of cyclase. 3. Econazol, SK&F 96365 and びプリン inducer are used to inhibit the influx of Ca^<2+> in CIF and to detect the sensitivity of tissues to chemicals. The more specific ROC mechanism of the のホルモン inducer and the specific に hindering することを见出した. 4. The inhibitory effect of ROC is to induce the secretion of leucorrhea (submandibular gland) Cell) およびカテコールアミン secretion (クロマフィン cell) をKOに inhibits した.これらのachievementは, ROC organization's information 伝达 Material としてCIF がCa^<2+> inflow をinduced きrise こし, non-excitable cells のみならずexcitatory cells It is important to consider the possibility of cell activation, the possibility of fruiting, and the existence of differences in ROC mechanisms and tissues. It shows the possibility of opening the new medicine by increasing the sensitivity of the medicine and the selection of the tissue. In addition, CIF's unified decision-making time is not necessary, and ROC organization's explanation is difficult and difficult.なおこの点については下注された题目であり, and now I’m going to study more を気入めている.

项目成果

K. Shibata, K. Morita, S. Kitayama H. Okamoto and T. Dohi: "Ca^<2+>entry induced by calcium influx factor and its regulation by protein kinase C in rabbit neutrophils." Biochemical Pharmacology. (in press).

K. Shibata、K. Morita、S. Kitayama H. Okamoto 和 T. Dohi：“钙流入因子诱导的 Ca^2 进入及其在兔中性粒细胞中受蛋白激酶 C 的调节”。