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マウステラトカルシノーマF9細胞の腫瘍生増殖から分化への切り換えの制御機構の解明

阐明小鼠畸胎瘤F9细胞肿瘤生长向分化转变的调控机制

基本信息

批准号：
07672169
负责人：
墨哲郎
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672169/
关键词：
テラトカルシノーマ分化オカダ酸リン酸化シスプラチン

项目摘要

1.plasmid rescue法を用いて,pAP3neoに組み込んだcDNA libraryをscreeningしたが,ts性を相補するcDNAは単離できなかった.今後,新たなcDNA libraryを作成すると共に,よりselection pressureをかける選択法を用いたcloningを計画中である.2.オカダ酸(セリン・スレオニンフォスファターゼ1,2阻害剤)をF9細胞を作用させると細胞は著しい形態変化をおこすと共に細胞周期のM期にて停止した.その際,濃度依存性に,かつ経時的に分化マーカーであるplasminogen activatorの産生を認めた.さらに,Northen blotでplasminogen activator,laminin B1,jun関連遺伝子群(c-jun,junB,junD)の発現を認めた.さらに,このJUNの発現によるAP-1の活性化がTRE(TPA-responsive element)を介するものであることがCAT Assayにて明らかとなった.これらのことから,オカダ酸によるフォスファターゼ阻害が蛋白質のリン酸化の見掛け上の活性化を惹き起こし,AP-1の活性化を介してF9細胞の分化マーカー遺伝子の発現を誘導したと考えられた.3.F9細胞に抗癌剤であるシスプラチン(CDDP)を作用させるとplasminogen activator,laminin B1,c-junの発現がみられ,アポトーシスに至る前に分化が誘導された.その際,細胞周期はG2-M期で停止するが,その過程でp53は変化せず,cdc2の消失が関与していることが明らかとなった。

1. The plasmid rescue method was used to screen cDNA library, and the cDNA library was screened by pAP3 neo. In the future, a new cDNA library will be created, and the selection pressure will be changed. The cloning method will be used in the project. 2. The acid will act on F9 cells, and the cell will change its morphology. At the same time, concentration-dependent, time-dependent differentiation, plasminogen activator production and recognition. In the evening, Northern blot was used to identify plasminogen activator,laminin B1,jun related gene subgroup (c-jun,junB,junD). In addition, the activation of AP-1 in the JUN detection system was detected by the CAT Assay. 3. The activation of AP-1 in F9 cells induced by anti-cancer agent CDDP The first step is to differentiate. During this period, the cell cycle stops at G2-M phase, p53 changes, cdc2 disappears, and so on.