靭帯機能を有する人工歯根膜製造技術の開発

具有韧带功能的人工牙周膜制造技术的开发

• 批准号: 15H06043
• 负责人: 二木 正晴
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-08-28 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H06043/
• 关键词: ADAMTSL6β; ECMネットワーク; フィブリリン -1; 歯根膜細胞; Layer by Layer technique; 三次元的培養; オキシタラン線維; 弾性機能

マウスより歯根膜細胞を採取し、この歯根膜細胞にADAMTSL6βを作用させフィブリリン-1 の再生誘導を試みた。フィブリリン-1 の再生誘導は次の2通りの方法で行なった。一 方 は 発現ベクターにより ADAMTSL6β を 過 剰 発 現させることによりフィブリリン-1 再生 を促す方法で発現誘導を行い、もう一方は組み換えタンパク ADAMTSL6βを細胞培養培地に加える方法で発現誘導を行なった。これら２つの方法によるフィブリリン-1の形成しオキシタラン線維を有する細胞株を作製した。フィブリリン－１やオキシタラン線維の形成はRT―PCR法、HE染色、免疫染色などで確認した。次に、ファイブロネクチンやゼラチン、インテグリンなど細胞表面に存在し、細胞同士の接着 に関与する分子を利用し細胞を三次元的に積み重ねる細胞積層法を応用する「Layer by Layer technique」を用いることにより、フィブリリン－１を形成した細胞を三次元的に積み重ねることを試みた。「Layer by Layer technique」は既に市販されている試薬を使用し歯根膜細胞の三次元構造構築を行なった。このようにして作製した細胞塊の立体的な機能評価に関して、次の２つの方法で解析した。１つ目は、立体的に培養された歯根膜細胞に関してオキシタラン線維を再構築しているかを組織学的に解析を行なった。２つ目は 機能的なオキシタラン線維を再構築しているかを、位相差顕微鏡を用いた live imaging による細胞の引っ 張り試験で解析を行なった。

Adamtsl6β-induced regeneration of dental root membrane cells The method of regeneration induction of-1 One side is to discover ADAMTSL6β, the other side is to discover ADAMTSL6β, the other side is to discover ADAMTSL 6 β, the other side is to discover ADAMTSL 6 β, the other side is to discover ADAMTSL6β, and the other side is to discover ADAMTSL6β. 2. The method of producing cell lines The formation of the line was confirmed by RT-PCR, HE staining and immunostaining. The cell lamination method uses the "Layer by Layer technique" to form a three-dimensional accumulation of cells. "Layer by Layer technique" is used to construct three-dimensional structures of root membrane cells. This is the first time that we have analyzed the three-dimensional functional evaluation of cell blocks. 1. Stereo-culture of root membrane cells is related to the re-construction of the root membrane and histological analysis. 2. The function of the microscope is to reconstruct the line dimension of the microscope and to analyze the cell tension.