感染によるBRONJ発症促進メカニズム：リン酸トランスポーターの役割

感染导致 BRONJ 发病的机制：磷酸盐转运蛋白的作用

• 批准号: 15H06046
• 负责人: 木山 朋美
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-08-28 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H06046/
• 关键词: ビスホスホネート; 顎骨壊死; リン酸トランスポーター

本研究の目的はビスホスホネート(BP)の細胞内取り込み機序の同定から、BP関連顎骨壊死(BRONJ)の発症機序の解明・治療法の確立へと発展させることである。BPの細胞内取り込み機序として、これまでに、複数のリン酸トランスポーターの関与を示唆する結果を得ていた。そこで、本年度はさらなるリン酸トランスポーターの特定を目指した。現在、リン酸トランスポーターとして、3種類のファミリー（SLC17、SLC20、SLC34）が存在し、それぞれのファミリーには、複数のアイソフォームが同定されている。このうち、口腔および周辺各組織に局在するSLC20、SLC34に焦点を当て、検討を行った。血管内皮細胞から、SLC20およびSLC34遺伝子を、siRNAにより除去し、N-BPの細胞毒性とradio-isotope標識N-BPの取り込み量の評価を行った。その結果、siRNA処理されていない血管内皮細胞に比べ、SLC34遺伝子ノックダウン細胞株では、細胞毒性が減少し、radio-isotope標識N-BPの細胞内取り込み量も減少した。他方、BRONJの病態をより反映したマウス顎骨壊死モデルを用い、C57/BL6 ワイルドタイプ（WT）マウスと、SLC20およびSLC34コンディショナルノックアウト（CKO）マウスにおけるBRONJへの影響を検討した。この顎骨壊死モデルでは、BPを7日毎に1か月間、腹腔内注射した後、第一大臼歯の抜歯を行い、その2週間後に顎骨壊死発症頻度・血管障害状態の評価を行った。その結果、WT群に比べ、SLC34群では、顎骨壊死の発症および血管障害所見が有意に抑制された。以上の結果より、BPはリン酸トランスポーターSLC34を介して細胞内に取り込まれ、同機序は、Bronj抑制の分子標的になる可能性が示唆された。

The aim of this study is to identify the intracellular mechanisms of BP and to elucidate the mechanisms of BP-related jaw death (BRONJ). The results of the intracellular selection process of BP were obtained. This year, the company has set up a number of special projects. At present, three kinds of software (SLC17, SLC20 and SLC34) exist in the same time, and the software of complex software is also in the same time. SLC20 and SLC34 are the focal points for discussion. Vascular endothelial cells, SLC20, SLC34, siRNA, cytotoxicity of N-BP, radio-isotope labeling, and quantitative evaluation of N-BP were evaluated. The results showed that siRNA treatment reduced the cytotoxicity of vascular endothelial cells, SLC34 cells, and the intracellular concentration of radio-isotope labeled N-BP. The influence of BRONJ on the disease response of others, C57/BL6, WT, SLC20, SLC34, CKO and BRONJ is discussed. The frequency of jaw bone death and vascular damage were evaluated after 1 month of intraperitoneal injection every 7 days of BP, 2 weeks after the onset of the first maxillary tooth. Results: WT group, SLC34 group, jaw disease and vascular damage were intentionally suppressed. The above results indicate the possibility of intracellular targeting, homologous sequence targeting and Bronj inhibition by BP receptor SLC34.

项目成果

Prevention of mouse BRONJ by an inhibitor of phosphate transporters.

通过磷酸盐转运蛋白抑制剂预防小鼠 BRONJ。

• 发表时间: 2015
• 作者: T. Kiyama;M. Tsuchiya;K. Nishimura;K.Sasaki T. Kawai and Y. Endo.
• 通讯作者: K.Sasaki T. Kawai and Y. Endo.

Phosphonocarboxylates Can Protect Mice Against the Inflammatory and Necrotic Side Effects of Nitrogen-Containing Bisphosphonates by Inhibiting Their Entry into Cells via Phosphate Transporters.

膦酰基羧酸盐可以通过抑制含氮双膦酸盐通过磷酸转运蛋白进入细胞来保护小鼠免受含氮双膦酸盐的炎症和坏死副作用。

• 发表时间: 2016
• 期刊: Biological and Pharmaceutical Bulletin
• 影响因子: 2
• 作者: Kiyama;T.;Tsuchiya;M.;Okada;S.;Oizumi;T.;Yamaguchi;K.;Sasaki;K.;Sugawara;S.;Endo;Y.
• 通讯作者: Y.