細菌リポプロテインの脂質修飾機構の解明

阐明细菌脂蛋白的脂质修饰机制

• 批准号: 16H07391
• 负责人: 安達 健朗
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Nagasaki International University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-08-26 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H07391/
• 关键词: 細菌リポプロテイン; 黄色ブドウ球菌; グラム陽性細菌; 脂質修飾

細菌リポプロテインは物質取り込みや、ほ乳類自然免疫受容体に対する免疫原性に重要な役割を持つ。細菌リポプロテインの脂質修飾酵素アポリポプロテインN-アシルトランスフェラーゼ (Lnt) は大腸菌において同定されているが、黄色ブドウ球菌等のグラム陽性菌ではLntの実体は未解明である。本研究では、大腸菌Lntが反応中間体としてS‐アシル化体を安定に生成することに着目し、黄色ブドウ球菌Lntの同定を試みた。黄色ブドウ球菌の膜タンパク質画分に対して、S‐アシル化タンパク質の網羅的同定方法であるアシル‐ビオチン交換法を用いて候補タンパク質の同定を行った。質量分析により複数の機能未知タンパク質が同定された。このうち２種のタンパク質のリコンビナントタンパク質を作出し、黄色ブドウ球菌内においてS‐アシル化修飾を受けていることが確認された。当該タンパク質の遺伝子欠損株ではリポプロテインの過剰発現により増殖阻害が起きること、また当該タンパク質の過剰発現により、リポプロテイン画分の発現量が増大することが見出された。さらに、このタンパク質のさらに大腸菌において当該タンパク質と基質となる黄色ブドウ球菌リポプロテインを共発現させる系を構築した。その結果、大腸菌Lntの欠損による泳動パターンの変化が当該タンパク質の発現によってキャンセルされることを見出した。これらの結果から、当該タンパク質は黄色ブドウ球菌Lntの候補であると考えられる。本研究は、これまで未解明であった黄色ブドウ球菌Lnt候補遺伝子の同定、および黄色ブドウ球菌における新たな翻訳後修飾としてS‐アシル化の存在を解明したものである。

The natural immune acceptors of milk and milk should be used to determine the importance of immunogenicity. Bacteria, bacteria, lipids, enzymes, enzymes, In this study, in the reverse reaction of Lnt, we tested the production of diazepam and the Lnt of Streptococcus flavus. The same method for classifying the Internet of Xanthococcus spp., and for the application of S-DNA, is to use the same method to determine the number of users in the network. Quantitative analysis replication data machine can not be known to determine the same number of data. The two kinds of medical equipment were detected in the laboratory, and the chemical repairs of the bacteria in Streptococcus flavus were confirmed by the laboratory tests. When the information is not available in the market, it is necessary to prevent the occurrence of the disease, and when the cause of the disease occurs, it is necessary to draw a large number of samples. In the first place, please tell me that there is a lot of bacteria in the body, so that you can get rid of the bacteria. According to the results of the test, the Lnt was unable to perform the swimming test when it was detected that it did not cause any health problems. The results show that the Lnt will be infected with xanthococci in the first place. In this study, we did not understand that there was an explanation for the presence of yellow bacteria, cocci, Lnt phenotypes, yellow cocci, cocci, new cocci, S-cocci, and so on.