匂い情報識別の分子機構

本研究課題ではcAMPのシグナル強度によって転写量が変わる軸索投射因子のスクリーニングを行った。我々は嗅覚受容体(odorant receptor: OR)のG蛋白質共役部位であるDRYモチーフをRDY配列に変えた変異型ORを作成した。この様なORを発現する嗅細胞では殆どOR分子からのシグナルが入らない為に軸索投射が行えず、野生型ORを発現する嗅細胞と比較して、遺伝子の転写プロフィールに差の出る事が期待された。これら2種類の嗅細胞からmRNAを調製し、遺伝子の発現パターンをsingle-cell RT-PCRによって比較することにより、軸索投射に関与する遺伝子の探索を行った。その結果Neuropilin-1など、CNGチャンネル非依存的に発現し嗅球上のAP軸に沿った投射を制御するガイダンス分子と、Kirrelやephrir-AなどCNG依存的で軸索選別に関与すると思われる分子を同定した。現在これら分子について、トランスジェニックマウスを用いたgain of functionのモザイク解析を行っている。

本研究課題ではcAMPのシグナル強度によって転写量が変わる軸索投射因子のスクリーニングを行った。我々は嗅覚受容体(odorant receptor: OR)のG蛋白質共役部位であるDRYモチーフをRDY配列に変えた変異型ORを作成した。この様なORを発現する嗅細胞では殆どOR分子からのシグナルが入らない為に軸索投射が行えず、野生型ORを発現する嗅細胞と比較して、遺伝子の転写プロフィールに差の出る事が期待された。これら2種類の嗅細胞からmRNAを調製し、遺伝子の発現パターンをsingle-cell RT-PCRによって比較することにより、軸索投射に関与する遺伝子の探索を行った。その結果Neuropilin-1など、CNGチャンネル非依存的に発現し嗅球上のAP軸に沿った投射を制御するガイダンス分子と、Kirrelやephrir-AなどCNG依存的で軸索選別に関与すると思われる分子を同定した。現在これら分子について、トランスジェニックマウスを用いたgain of functionのモザイク解析を行っている。