糖尿病網膜症の栄養因子を用いた神経保護的治療戦略の検討

使用营养因子检查糖尿病视网膜病变的神经保护治疗策略

• 批准号: 21890039
• 负责人: 忍足 俊幸
• 金额: $ 0.86万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890039/
• 关键词: 糖尿病網膜症; 神経保護; 神経再生; BDNF; NT-4; citicoline; caspase-9; caspase-3

成熟ラット網膜をコラーケンケルに包埋し、正常濃度、高濃度グルコースで培養維持した。次いでBDNF, NT-4, citicoline, VEGF120, VEGF164を最適濃度で付加し7日後に再生突起数を観察した。観察後網膜切片を固定し凍結切片を作成、TUNEL染色およびcaspase-9, caspase-3の免疫染色を施行した。GCLにおけるTUNEL陽性率,caspase-9, caspase-3の免疫活性陽性率を解析した。その結果、正常濃度グルコース群に比べ高濃度グルコース群では再生突起数は有意に減少しTUNEL陽性率は有意に増加した。また、caspase-9, caspase-3の免疫活性も有意に増加した。BDNF, NT-4, citicolineを付加した群ではTUNEL陽性率は有意に減少し、再生突起数は有意に増加した。また、capsae-9, caspase-3の免疫活性も有意に減少した。VEGF120, VEGF164を付加した群ではTUNEL陽性率は改善したが再生突起数の増加は得られなかった。以上の結果から、高濃度グルコースはバイオケミカルなinjuryとしてcaspase-9, caspase-3の活性化を介して網膜神経細胞に細胞死を誘導し、再生突起数を減少させることが示唆された。BDNF, NT-4, citicolineはcaspase-9, caspase-3の活性化を抑制することで再生突起数を減少させ細胞死を救済することが示唆された。高濃度グルコースで活性化されるcaspase-9, caspase-3は人糖尿病網膜の神経病変においても同様に観察された現象であり、本実験の細胞死のメカニズムは部分的には人糖尿病網膜で見られる神経病変に共通する。本研究ではBDNFよりもNT-4のほうが救済効果や再生誘導に優れていた傾向が見られた。また、citicolineは救済効果はBDNF,NT-4に劣っても臨床上の安全面が確立されている薬剤であり、糖尿病網膜症の臨床応用に大きなアドバンテージがあると思われた。

Mature ラ ッ ト retinal を コ ラ ー ケ ン ケ ル に embedding し, normal concentration, high concentration グ ル コ ー ス で develop maintain し た. The suboptimal concentration of を でBDNF, NT-4, citicoline, VEGF120, VEGF164 で the number of regenerated protrusions に the number of regenerated protrusions を観 is observed at た. Youdaoplaceholder0 post-examination retinal section を fixation, <s:1> frozen section を preparation, TUNEL staining およびcaspase-9, caspase-3 <s:1> immunostaining を performance of <s:1> た. GCLにおけるTUNEL positive rate,caspase-9, caspase-3 <s:1> immune activity positive rate を analysis た. そ の results, concentration of normal グ ル コ ー ス group に high concentrations than べ グ ル コ ー ス group で は regeneration processes for は intentionally に reduce し TUNEL positive は intentionally に raised plus し た. Youdaoplaceholder0, caspase-9, caspase-3 <s:1> immune activity また intentionally increases に た. BDNF, NT-4, and citicolineを addition to the <s:1> た group で the positive rate of <s:1> TUNEL <s:1> intentionally decreased に, and the number of regenerated protrusions <e:1> intentionally increased に た た. Youdaoplaceholder0, capsae-9, caspase-3 <s:1> immune activity に intentionally reduces に た. VEGF120, VEGF164 を plus し た group で は TUNEL positive は improve し た が regeneration processes は referred to several の raised be ら れ な か っ た. の above results か ら, high concentration グ ル コ ー ス は バ イ オ ケ ミ カ ル な injury と し て caspase - 9, caspase 3 の activeness を interface し て retinal god に 経 cells induced cell death を し, regeneration processes reduced を さ せ る こ と が in stopping さ れ た. BDNF, NT - 4, citicoline は caspase - 9, caspase 3 の activeness を inhibit す る こ と で regeneration processes reduced を さ せ cell death を save 済 す る こ と が in stopping さ れ た. High concentration グ ル コ ー ス で activeness さ れ る caspase - 9, caspase 3 は diabetic retinal の 経 disease - god に お い て も with others に 観 examine さ れ た phenomenon で あ り, this be 験 の cell death の メ カ ニ ズ ム は part of に は diabetic retinal で see ら れ る 経 disease - god に common す る. This study で は BDNF よ り も NT - 4 の ほ う が save 済 unseen fruit や regeneration induced に optimal れ て い た tendency が see ら れ た. ま た, citicoline は save 済 unseen fruit は BDNF, NT - 4 に substandard っ て も clinically の AnQuanMian が establish さ れ て い る 薬 tonic で あ り の clinical diabetic retinopathy, 応 with に big き な ア ド バ ン テ ー ジ が あ る と think わ れ た.

项目成果

糖尿病網膜の初期神経細胞死におけるc-Fos/c-Jun発現の関与

c-Fos/c-Jun 表达参与糖尿病视网膜早期神经元细胞死亡

• 发表时间: 2009
• 作者: 忍足俊幸;等
• 通讯作者: 等

Transcription factor, SP1, in epiretinal membranes of patients with proliferative diabetic retinopathy.

• DOI: 10.1016/j.diabres.2009.12.008
• 发表时间: 2010-03
• 期刊: Diabetes research and clinical practice
• 影响因子: 5.1
• 作者: Natsuyo Yoshida-Hata;Y. Mitamura;T. Oshitari;K. Namekata;C. Harada;T. Harada;S. Yamamoto

網膜色素変性症の遺伝子治療

色素性视网膜炎的基因治疗

• 发表时间: 2009
• 期刊: 臨床眼科 63
• 作者: 忍足俊幸;山本修一
• 通讯作者: 山本修一

Enhancement of neurite regeneration in isolated adult rat diabetic retinas by neurotrophic factors and citicoline.

神经营养因子和胞磷胆碱增强离体成年大鼠糖尿病视网膜的神经突再生。

• 发表时间: 2009
• 作者: Oshitari T;et al.
• 通讯作者: et al.