新規骨吸収抑制シグナルの同定

新型骨吸收抑制信号的鉴定

• 批准号: 21K21054
• 负责人: 佐々木 桃子
• 金额: $ 2万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-08-30 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K21054/
• 关键词: 骨吸収; パーキンソン病; 骨粗鬆症; 破骨細胞

パーキンソン病と骨粗鬆症に関連性があることから、パーキンソン病原因遺伝子であるUCHL1の骨組織における動態を解明するため、破骨細胞に着目した。破骨細胞形成に対して、UCHL1がどのような動態を示すのかin vitro下で解析を行うため、まずは破骨細胞易形成株であるRAW細胞を用い、UCHL1ノックアウト細胞株を作製した。破骨細胞を誘導した後、TRAP染色を行ったところ、UCHL1ノックアウト細胞株ではより大きな破骨細胞の形成が認められた。また破骨細胞形成が促進すると、細胞同士が融合し、より多角化した破骨細胞が見られることから、上記の細胞を用いて多角化破骨細胞の核の数を計測した。UCHL1ノックアウト細胞株ではコントロール細胞と比較してより多くの多核化破骨細胞が認められた。さらにUCHL1ノックアウト細胞を用いて、RNAを回収し、RT-qPCRを用いて破骨細胞マーカーの上昇の有無を解析した。UCHL1ノックアウト細胞株では破骨細胞分化マーカーの上昇が認められたことから、UCHL1破骨細胞形成においてそのシグナル伝達に関与している可能性が考えられた。この破骨細胞分化に限らず、様々なシグナル伝達経路においてユビキチン化がその反応に関与していることが知られている。UCHL1は脱ユビキチン化酵素としても知られることから、その脱ユビキチン化活性が破骨細胞形成にどのように関与しているかについての解析も進めた。また以上の実験と並行して、UCHL1自然欠失型のパーキンソン病モデルマウスであるgadマウスを用いて骨組織の解析を行ない、CTを用いた解析および組織学的な解析から、gadマウスにおいて骨密度の低下および破骨細胞に関連するパラメーターの上昇が認められている。今後の課題として、骨における影響がUCHL1によるものなのか、またはその他の因子によるものなのかを追究する必要がある。

The relationship between bone disease and osteoporosis is discussed in detail. Osteoclast formation, UCHL1, osteoclast-prone strain, RAW cell strain, UCHL1, osteoclast-prone strain After osteoclast induction, TRAP staining was performed, and UCHL1 cell lines were identified for osteoclast formation. The number of nuclei of osteoclasts was measured by the number of nuclei of osteoclasts that were polyhedrally formed. UCHL1 cell line is a polynuclear osteoclast cell line. UCHL1 is used to analyze osteoclasts, RNA is used to analyze osteoclasts and RNA is used to analyze osteoclasts. UCHL1 cell line was identified as osteoclast differentiation, and the possibility of osteoclast formation was examined. The osteoclast differentiation is restricted to the growth and development of osteoclasts. UCHL1 is responsible for the analysis of osteoclast formation by enzyme activity. UCHL1 natural deficiency type of bone mineral density and osteoclast bone mineral density are related to bone tissue analysis and histological analysis. In the future, it is necessary to investigate the influence of UCHL1 on other factors.