眼窩下神経結紮モデルを用いた、神経障害性疼痛に対するNetrin-1の関与の検討

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まずSDラットを導入後にラットを乗せる台や時間等を考慮しながら1週間かけて環境に馴化させた。その後vonFreyフィラメントを用いてラットのWisker padに刺激を与え、それに対する行動を評価した。１）眼窩下神経結紮後７，１４日にvonFrey フィラメントを用いて行動評価を行い、疼痛閾値の変化を検討した。７，１４日目に結紮前と比較して、疼痛閾値は低下しており、サンプル数を増やすことでその差はより顕著になると考えられた。今後、７，１４，２１日において行動評価を行い、そのサンプル数を増やして解析する。２）眼窩下神経結紮後14日目に疼痛閾値が低下した個体を灌流固定し、免疫組織学的検討を行った。一次抗体として抗Netrin-1抗体（NB100-1605）、抗NeuN抗体（MAB377）を使用した。三叉神経脊髄路核尾側亜核（Vc）および上部頚髄（C1-C2）において、Netrin-1は発現を認めた。Netrin-1は神経結紮群（CCI群）と擬似オペ群（Sham群）とで比較するとCCI群でより発現が増加していた。その発現細胞としては神経細胞にも発現を認めたが、それ以外の細胞にも発現していると考えられ、今後ミクログリアやアストロサイトでの発現を解析するとともに、サンプル数も増やして明らかな差があるかどうかを解析する。現在得られた結果からはまだ明らかな関与は断言できないが、サンプル数を増やし、解析を進めることでNetrin-1が眼窩下神経結紮による神経障害性疼痛に関与の可能性をを明らかにできるのではないかと考えられる。