マウス胚性幹細胞分化に伴うゲノムの核内高次折り畳み構造変化の分子基盤
小鼠胚胎干细胞分化过程中基因组核高阶折叠结构变化的分子基础
基本信息
- 批准号:22870033
- 负责人:
- 金额:$ 2.01万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
- 财政年份:2010
- 资助国家:日本
- 起止时间:2010 至 2011
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
哺乳類発生過程において、未分化な胚細胞は分化に伴ってグローバルな染色体構造を変化させる。この構造変化は、細胞のエピジェネティックな変化を表象したものと考えられるがその意義は未だ不明である。私はこの構造変化が顕著に認められる染色体領域及び発生時期をゲノムワイドDNA複製タイミング解析とFISH及び電顕解析により検討した結果、マウスES細胞が後期epiblast様細胞(EpiSC細胞)に分化した時点で大きな染色体構造変化が起こることを見出した。本研究は、この変化がマウス初期発生における重要な分岐点であるという仮説に立脚し、その分子基盤の解明を目的とした。具体的には、マウスES細胞のEpiSC細胞への分化系を確立し、siRNA作製・導入の系を確立し、ES細胞のEpisc細胞への分化を阻害する因子をsiRNAスクリーニングにより同定することを目標に設定した。昨年度はsiRNA作製・導入の系を確立した。また実験的困難に伴い当初の予定を変更して雌胚性癌腫細胞のX染色体不活性化/再活性化を指標としてsiRNAスクリーニングを行うことを計画した。マウスES細胞のEpisc細胞への分化はX染色体不活性化を伴うが、私はX染色体不活性化がこの時期に起きる重要なクロマチン構造変化の一つと考えている。また、雌胚性癌腫細胞のX染色体不活性化の解除に伴って常染色体の核内配置も一部変化したため(FISH 解析)この培養系でグローバルな染色体構造変化が実際に起きていることが示唆された。ゆえに、この新たなスクリーニング計画は当初の研究目的に沿うものである。本年度は胚性癌腫細胞のX染色体不活性化/再活性化を人為的に引き起こして全ゲノム遺伝子発現のプロファイル変化を調べ、染色体構造変化に関与する可能性のある候補遺伝子をリストアップした。現在リストの上位70のsiRNAを作製し、表現型解析を行っている。
The process of mammalian birth involves the transformation of undifferentiated embryonic cells and the transformation of the chromosome structure.このstructural changeは、cellのエピジェネティックな変化をappearanceしたものと考えられるがそのmeaningは不だUnknownである. The field of private structure change and the recognition of the chromosome field and the birth period of the disease DNA replication analysis and FISH analysis and electrochemical analysis As a result, the time point of differentiation of the late-stage epiblast cells (EpiSC cells) of Masato ES cells and the changes in the chromosome structure were revealed. This study is based on the important bifurcation points of the initial development of the molecular basis and the purpose of explaining the molecular basis of this study. Specifically, the differentiation line of EpiSC cells and the siRNA production and introduction line have been established, and the ES cells have been established. Episc cells are divided into differentiating factors, and the siRNA is used to set the target. Last year, the system for producing and introducing siRNA was established. The difficulty of this process is due to the inactivation of the X chromosome in the cells of female embryonic carcinoma. Chemicalization / reactivation of the siRNA indicator and the siRNA program. MASES ES cells and Episc cells are differentiated and X-chromosome inactivated and stained with X-chromosomes. The period of inactivation of the color body is important and the structural change is important. The elimination of X-chromosome inactivation in female embryonic carcinoma cells and the partial change of the nuclear configuration of autosomal chromosomes (FISH Analysis) このculture system でグローバルな Chromosome structure change が実间に出きていることが Shows instructing された.ゆえに, この新たなスクリーニング plan and the original research purpose was に恆ものである. This year, the inactivation/reactivation of theプロファイル剉化を调べ, Chromosome Structure Changing にSeki and するpossibility のある candidate addendum 伝子をリストアップした. Nowadays, RAS is on top of 70 siRNA production and phenotypic analysis.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Genome-Wide Dynamics of DNA Replication Timing Revealed by In Vitro Models of Mouse Embryogenesis-Implications for Higher-Order Genome Organization And Its Developmental Regulation
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- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:政池知子;他;平谷伊智朗
- 通讯作者:平谷伊智朗
Evolutionarily conserved replication timing profiles predict long-range chromatin interactions and distinguish closely related cell types
- DOI:10.1101/gr.099655.109
- 发表时间:2010-06-01
- 期刊:
- 影响因子:7
- 作者:Ryba, Tyrone;Hiratani, Ichiro;Gilbert, David M.
- 通讯作者:Gilbert, David M.
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