オーガナイザー特異的ホメオドメイン蛋白質Xlim-1の活性制御機構の解析

组织者特异性同源域蛋白Xlim-1活性控制机制分析

• 批准号: 02J07965
• 负责人: 平谷 伊智朗
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J07965/
• 关键词: 転写制御; Xlim-1; Ldb1; XRnf12; オーガナイザー; RLIM; アフリカツメガエル; LIMホメオドメイン蛋白質; ユビキチン; プロテアソーム

初期発生過程における転写制御機構を探る目的でツメガエルのオーガナイザーに特異的に発現する転写因子Xlim-1の制御因子Ldb1の分解制御因子XRnf12/RLIMの機能解析をさらに推し進めた。まず2次軸形成の実験系を用いてXlim-1/Ldb1 4量体形成を支持するデータを得た。過剰発現実験によるオーガナイザー遺伝子の発現変化を調べた所、Ldb1或いはXRnf12の単独過剰発現によって特定の遺伝子群が発現抑制されたがLdb1とXRnf12の共発現により発現抑制は全て解除され、Xlim-1の標的遺伝子は全てLdb1とXRnf12両方によって発現抑制された。以上の結果は「XRnf12がXlim-1未結合のLdb1の選択的分解を引き起こし、このことがXlim-1とLdb1の量比を適切に保ちXlim-1/Ldb1 4量体による正常な転写制御を保証している」との結論を強く支持した。一方、発生過程における時期特異的転写制御においてXlim-1、Ldb1のような個々の転写因子の域を超えたメカニズムの存在を強く意識するに至り、細胞周期と遺伝子発現の接点が鍵になると考え「DNA複製時期と遺伝子発現の相関」という現象に注目した。「遺伝子発現の変化」に先行して「DNA複製時期」が変化するという仮説を立て本年度半ばより米国ニューヨーク州立大学David Gilbert研究室に出向き、この仮説を検証する実験系の立ち上げにとりかかった。現在までの所、ES細胞の神経分化の系を用いてこの実験系を確立し遺伝子発現変化に伴うDNA複製時期の変化を直接観察することに初めて成功した。複製時期変化は低GC含量遺伝子において高確率で観察され、ゲノムの全遺伝子の3割以上が発生過程においてDNA複製時期制御を受けていると推測され、オーガナイザーの分子基盤のみならず初期発生過程における転写制御全般の根幹に迫れると考えている。

The initial growth process, the control mechanism, the purpose of the control mechanism, the purpose of the development, the specific growth factor, the present factor Xlim-1's control factor Ldb1's decomposition control factor XRnf12/RLIM's functional analysis is carried out. The secondary axis formation system is supported by the Xlim-1/Ldb1 4-dimensional volume formation system.尰発appear実験によるオーガナイザー缝子の発appear変化を动べた所, Ldb1 orいはLdb1 and XRnf12 are all suppressed, and Xlim-1 is the target of the remaining genes. Ldb1 and XRnf12 are suppressed. The above results show that the decomposition of XRnf12 and Xlim-1 unbound Ldb1 was selected, and the quantitative ratio of Xlim-1 and Ldb1 was appropriate and guaranteed. 4-dimensional volume, normal writing, control, guarantee, conclusion, strong support, and guarantee. On the one hand, there is a special 転WRITING control system during the development process においてXlim-1, Ldb1 のような一々の転WRITING FACTOR の区を超えたメカニズムのを强くconsciousnessするに到り、The cell cycle and the contact point がkey of the remaining 伝子発appears になるとtestえ "The DNA replication period and the remaining 缝子発appears related" and the というphenomenon is noticed. "The period of DNA replication" is the first step in the transformation of "the period of DNA replication". Gilbert's laboratory is dedicated to the development of the science and technology. Nowadays, the system of differentiation of ES cells has been established using the system of ES cells. The direct observation of the changes in the DNA replication period and the success of the changes in the early stages of DNA replication. Control of DNA replication period by changing the process of low GC content in the replication period.をReceived けているとguess され、オーガナイザーのmolecule base のみならずThe process of early development is written in the form of "Control All Roots".

项目成果

Hiratani, I., Yamamoto, N., Mochizuki, T., Ohmori, S., Taira, M.: "Selective degradation of excess Ldb1 by Rnf12/RLIM confers proper Ldb1 expression levels and Xlim1/Ldb1 stoichiometry in Xenopus organizer functions"Development. 130. 4161-4175 (2003)

Hiratani, I.、Yamamoto, N.、Mochizuki, T.、Ohmori, S.、Taira, M.：“Rnf12/RLIM 对过量 Ldb1 的选择性降解赋予爪蟾组织者功能中适当的 Ldb1 表达水平和 Xlim1/Ldb1 化学计量”