CD8陽性T細胞におけるヒストンメチル化の制御ネットワークの解明

阐明 CD8 阳性 T 细胞中组蛋白甲基化的调控网络

基本信息

批准号：
22890172
负责人：
荒木靖人
金额：
$ 2.01万
依托单位：
Saitama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22890172/
关键词：
T細胞ヒストンメチル化クロマチン転写因子転写制御

项目摘要

CD8陽性T細胞の分化の機序及びエフェクター機能がどのように制御されているかはいまだ不明である。申請者らはエピジェネティックス機構の中でもヒストン修飾(ヒストンアセチル化・メチル化)による遺伝子発現の制御が、CD8陽性T細胞の機能・分化において重要であることを報告してきた。本研究では、ピストン修飾がどのようにCD8陽性T細胞において制御されているかを調べるために、CD8陽性T細胞の機能・分化に重要な役割を持つヒストンメチル化修飾酵素の同定及び機能の解析を行う。今年度得られた結果としては、メモリーCD8陽性T細胞で特異的に発現しているヒストンメチル化修飾酵素の同定するために、マウスCD8陽性T細胞からナイーヴ細胞(CD62L陽性、CD44陰性)とメモリー細胞(CD62L陰性、CD44陽性)を分離した後、total RNAを抽出し、cDNAを作成した。これらのcDNAを用いて、ヒストンメチル化酵素とピストン脱メチル化酵素の遺伝子発現を定量的(リアルタイム)PCR法にて比較したところ、メモリーCD8陽性細胞において特異的に発現している酵素としてヒストンメチル化酵素Ezh2とNsd1、ヒストン脱メチル化酵素Fbx110を同定した。今後、これらの酵素のCD8陽性T細胞における機能、形成する複合体、その複合体中の分子のCD8陽性T細胞における機能の解明を調べる予定である。これらの結果は、CD8陽性T細胞におけるヒストンメチル化の制御ネットワークの解明につながる。細胞分化の一つのモデルとしての末梢血液中のCD8陽性T細胞を用いて、ヒストンメチル化を調節するエピジェネティックス機構を明らかにする事により、将来的にCD8陽性T細胞の分化・機能を人為的に操作する事が可能になると申請者は考えている。その結果、ウイルスなどに対するワクチンの効率的な作成などへの臨床応用が期待される。

CD8阳性T细胞的机制如何分化以及如何调节效应函数是未知的。在表观遗传机制中，申请人报告说，通过组蛋白修饰（组蛋白乙酰化和甲基化）调节基因表达在CD8阳性T细胞的功能和分化中很重要。在这项研究中，我们将研究如何在CD8阳性T细胞中调节活塞的修饰，并将识别和分析组蛋白甲基化修饰酶的功能，这些酶在CD8阳性T细胞的功能和区分中具有重要作用。今年获得的结果是，为了鉴定在记忆CD8阳性T细胞中特有表达的组蛋白甲基化修饰酶，将幼稚细胞（CD62L阳性，CD44负）和记忆细胞（CD62L阴性，CD44阳性）从小鼠CD8阳性T细胞中分离出来，并提取了总RNA以创建CDNA。使用这些CDNA，通过定量（实时）PCR方法比较组蛋白甲基酶和活塞脱甲基酶的基因表达，而组蛋白甲基酶EZH2和NSD1以及组蛋白甲基酶FBX110被鉴定为在记忆CD8阳性细胞中特定表达的酶。将来，我们将研究这些酶在CD8阳性T细胞中的功能，形成的复合物以及CD8阳性T细胞中这些复合物中分子的功能。这些结果导致阐明了CD8阳性T细胞中组蛋白甲基化的调节网络。申请人认为，通过阐明在外周血中使用CD8阳性T细胞调节组蛋白甲基化的表观遗传机制作为细胞分化的模型，将来可以人为地操纵CD8阳性T细胞的分化和功能。结果，预计将对临床应用有效地针对病毒等产生疫苗。