高感度質量分析法の開発に基づく1細胞アミノ酸メタボロミクスへの挑戦
基于高灵敏度质谱技术的发展对单细胞氨基酸代谢组学的挑战
基本信息
- 批准号:22K20718
- 负责人:
- 金额:$ 1.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-08-31 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
がん組織は不均一で、周辺環境によって代謝が変化することが知られている。そのため、代謝変動の詳細な解析には細胞1個レベルでの測定が望まれる。本研究では、がん細胞におけるアミノ酸メタボロミクスを1細胞レベルで実現することを目指して、誘導体化と質量分析を用いた高感度1細胞分析法の開発を行う。2022年度は、細胞を採取するガラスキャピラリー内での誘導体化に適した試薬および反応条件、分析条件を検討した。ガラスキャピラリーは容積が数十マイクロリットル程度で、誘導体化後に質量分析計で直接測定するため、微小空間での高い反応性と質量分析計での高感度な検出を両立する試薬の選定が必須であった。数種のアミノ酸誘導体化試薬を検討した結果、数マイクロリットルの溶液中でアミノ酸と反応し、エレクトロスプレーイオン化で高効率にイオン化されて質量分析計で高感度に検出される試薬を見出した。誘導体化反応については反応温度、反応時間、反応液のpH等をさらに検討し、簡便かつ迅速な反応手順を構築した。質量分析には三連四重極型質量分析計を採用し、誘導体化試薬に由来する特徴的なプロダクトイオンを用いたMS/MS分析により、誘導体化アミノ酸の高感度かつ選択的な検出を実現した。開発した手法をヒト肝がん由来細胞の分析に適用した結果、細胞内の微量アミノ酸を検出することに成功した。また、同一の誘導体化試薬を用いてLC-MS/MS分析法を構築し、大量細胞から調製した抽出液を測定した。得られたアミノ酸プロファイルは1細胞の測定結果と類似しており、開発した1細胞分析法を用いて細胞内のアミノ酸含量を評価可能であることが示された。さらに、同一の条件で培養した複数個の細胞をそれぞれ測定した結果、細胞間で含量の大きく異なるアミノ酸が存在し、1細胞レベルでの差異解析が可能であることが示唆された。
が ん organization は heterogeneity で, zhou 辺 environment に よ っ て metabolic が variations change す る こ と が know ら れ て い る. Youdaoplaceholder0 ため ため, detailed な analysis of metabolic changes に が cell 1 レベ で で <e:1> determination が see まれる. This study で は, が ん cells に お け る ア ミ ノ acid メ タ ボ ロ ミ ク ス を 1 cell レ ベ ル で be presently す る こ と を refers し て, inductor と quality analysis を with い た Gao Gan degree 1 cell analysis の open 発 う を line. 2022 annual は, cell を take す る ガ ラ ス キ ャ ピ ラ リ ー within で の inductor change に optimum し た try 薬 お よ び anti 応 condition, analyze を beg し 検 た. ガ ラ ス キ ャ ピ ラ リ ー は volume が dozens マ イ ク ロ リ ッ ト で ル degree, after the induction of body に quality analyzer で す directly る た め, tiny space で の high い anti 応 sex と quality analysis meter で の Gao Gan degrees な 検 out を struck made す る try 薬 の が must be selected で あ っ た. Several の ア ミ ノ acid induced body change 薬 を beg し 検 た results, several マ イ ク ロ リ ッ ト ル の solution で ア ミ ノ acid と anti 応 し, エ レ ク ト ロ ス プ レ ー イ オ ン change で high working rate に イ オ ン change さ れ て quality analysis meter で Gao Gan degrees に 検 out さ れ る try 薬 を shows し た. Inductor is changed the 応 に つ い て は against 応 temperature, anti 応 time, liquid 応 の pH を さ ら に beg し 検, simple か つ な quickly against 応 hand shun を build し た. Quality analysis に は three type even quadruple extremely quality analysis meter を made し, inductor try 薬 に origin す る of 徴 な プ ロ ダ ク ト イ オ ン を with い た MS/MS analysis に よ り, inductor ア ミ ノ acid の Gao Gan degrees か つ sentaku of な 検 out を be presently し た. Open 発 し た gimmick を ヒ ト liver が ん origin cells の analysis に apply し た results, intracellular の trace ア ミ ノ acid を 検 out す る こ と に successful し た. ま た, induced the same の body try 薬 を with い て を build し LC - MS/MS analysis, a large number of cells か ら modulation し た extract を determination し た. Have ら れ た ア ミ ノ acid プ ロ フ ァ イ ル は 1 cell の determination results と similar し て お り, open 発 し た を 1 cell analysis using い て intracellular の ア ミ ノ acid content を may review 価 で あ る こ と が shown さ れ た. さ ら に, condition of the same の で cultivate し た plural の cells を そ れ ぞ れ determination し た results, large intercellular で content の き く different な る ア ミ ノ acid が し, 1 cell レ ベ ル で の difference resolution が may で あ る こ と が in stopping さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
誘導体化による単一細胞内アミノ酸の高感度質量分析
通过衍生化对单个细胞内氨基酸进行高灵敏度质谱分析
- DOI:
- 发表时间:2023
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:細島大輝;山口侑季乃;西島公佳;古庄 仰;水野 初;唐川幸聖;原田真志;杉山栄二;岩畑大悟;轟木堅一郎
- 通讯作者:轟木堅一郎
チップ内誘導体化とダイレクトnanoESI-MSを用いた一細胞内アミノ酸の高感度分析
使用芯片内衍生化和直接 nanoESI-MS 对细胞内氨基酸进行高灵敏度分析
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:山口侑季乃;西島公佳;水野 初;古庄 仰;唐川幸聖;原田真志;杉山栄二;岩畑大悟;轟木堅一郎
- 通讯作者:轟木堅一郎
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
古庄 仰其他文献
宇宙アミノ酸を対象とする三次元キラルHPLC分析法の開発と炭素質隕石試料への適用
宇宙氨基酸三维手性HPLC分析方法的建立及其在碳质陨石样品中的应用
- DOI:
- 发表时间:
2021 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
古庄 仰;石井 千晴;秋田 健行;三田 真史;奈良岡 浩;浜瀬 健司 - 通讯作者:
浜瀬 健司
塩基性アミノ酸を対象とした三次元キラルHPLC分析法の開発とヒト尿中含量の解析
三维手性HPLC分析方法的建立及人尿中碱性氨基酸的含量分析
- DOI:
- 发表时间:
2020 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
植木 大和;古庄 仰;吉岡 夏輝;秋田 健行;三田 真史;井手 友美;浜瀬 健司 - 通讯作者:
浜瀬 健司
キラルアミノ酸の高選択的三次元HPLC分析を目的とする新規ミックスモードカラムの開発
开发用于手性氨基酸高选择性三维 HPLC 分析的新型混合模式色谱柱
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
永田 優凛;古庄 仰;石井 千晴;秋田 健行;三田 真史;浜瀬 健司 - 通讯作者:
浜瀬 健司
抗体医薬Trastuzumabに対する高親和性DNAアプタマーの探索研究
抗体药物曲妥珠单抗高亲和力DNA适配体探索性研究
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
青木萌恵;磯部亮太;小林直央;北條泰成;古庄 仰;杉山栄二;轟木堅一郎 - 通讯作者:
轟木堅一郎
水晶振動子マイクロバランス法による抗体医薬に対する抗イディオタイプDNA アプタマーの結合定数測定
石英晶体微天平法测定抗独特型DNA适体与抗体药物的结合常数
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
磯部亮太;小林直央;青木萌恵;古庄 仰;杉山栄二;水野 初; 轟木堅一郎 - 通讯作者:
轟木堅一郎
古庄 仰的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('古庄 仰', 18)}}的其他基金
がん一細胞内低分子代謝物の網羅的解析を実現する高感度質量分析法の開発
开发能够综合分析癌细胞中小分子代谢物的高灵敏度质谱方法
- 批准号:
24K18264 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
キラルアミノ酸の三次元HPLC一斉分析法開発と腎・心不全の新規診断マーカー探索
开发手性氨基酸同步三维高效液相色谱分析方法并寻找新的肾衰竭和心力衰竭诊断标志物
- 批准号:
19J21452 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
相似海外基金
全生物の共通祖先から遡る原始タンパク質のアミノ酸組成の探求
探索可追溯到所有生物共同祖先的原始蛋白质的氨基酸组成
- 批准号:
23K20903 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
アミノ酸代謝の恒常性維持機構の解明-グルカゴン作用と肝臓のzone特性を踏まえて
阐明氨基酸代谢稳态维持机制——基于胰高血糖素作用和肝脏区域特征
- 批准号:
23K24765 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
アミノ酸センサーを分子標的とした難治性骨系統疾患に対する先制医療技術の開発
以氨基酸传感器为分子靶点开发针对难治性骨病的先发医疗技术
- 批准号:
23K27346 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
強力なCas9阻害効果を持つ人工アミノ酸導入型・抗CRISPRタンパク質の開発
开发具有强Cas9抑制作用的人工氨基酸引入的抗CRISPR蛋白
- 批准号:
24K21107 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
『キラル複合型FLP触媒』と『水素』を活用したアミノ酸の不斉還元的アルキル化
使用“手性复合物FLP催化剂”和“氢”对氨基酸进行不对称还原烷基化
- 批准号:
24KJ1572 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
動脈硬化性疾患の代謝調整栄養因子、分枝鎖アミノ酸による口腔-腸連関制御機構の解明
阐明调节动脉硬化疾病代谢的营养因子支链氨基酸的口肠联动控制机制
- 批准号:
24K13101 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
二酸化炭素を用いたβ-アミノ酸合成法の開発:触媒的三成分反応の理論的設計
利用二氧化碳合成β-氨基酸方法的发展:催化三组分反应的理论设计
- 批准号:
24KJ0277 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
腸内免疫アミノ酸代謝とその変容による炎症性腸疾患増悪メカニズムの解明
阐明肠道免疫氨基酸代谢及其改变引起炎症性肠病加重的机制
- 批准号:
23K23782 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
気相・固相の反応素過程に基づくアミノ酸ホモキラリティー生成機構の解明
基于气相和固相基元反应过程阐明氨基酸同手性产生机制
- 批准号:
24K17108 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
アミノ酸混合物シスチン・テアニンの放射線防護効果の分子メカニズムの解明
阐明氨基酸混合物胱氨酸和茶氨酸辐射防护作用的分子机制
- 批准号:
24K14773 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 1.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)