アンチエイジング製品開発を目指したin vitro光老化リンパ管モデルの確立

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太陽光中、特に紫外線波長領域の長期曝露は、皮膚において深いしわ・たるみの形成を兆候とする光老化を促進させる。紫外線の曝露は、皮膚真皮中のⅠ型コラーゲンを分解・化学修飾する。また、真皮中のリンパ管は、光老化と密接に関連することが近年報告されている。しかしながら、紫外線照射により分解・変性したコラーゲンがリンパ管形成に与える影響については明らかとなっていない。したがって、本研究は、紫外線照射コラーゲンを用いて、in vitro光老化リンパ管形成モデルの作製および光老化生理的条件下におけるリンパ管形成機構を明らかにすることを目的した。Ⅰ型コラーゲンに対して、紫外線B (UVB) を0-300 J/cm2のエネルギーにより照射し、紫外線照射コラーゲンを作製した。SDS-PAGE電気泳動により、紫外線照射コラーゲンにおいて、コラーゲンの断片化が見られた。また、2,4-ジニトロフェニルヒドラジン (DNPH) を用いた比色法によりコラーゲンのカルボニル化促進が見られた。コラーゲンの断片化とカルボニル化は、紫外線照射エネルギー依存的に促進された。また、紫外線照射コラーゲンを用いてリンパ管内皮細胞における機能変化を検討した。はじめに、Collagen sandwich modelを応用してリンパ管の管腔形成を評価した (in vitro光老化リンパ管形成モデル)。その結果、紫外線照射コラーゲンを添加したリンパ管内皮細胞では、未照射コラーゲン添加群と比べて、管腔形成の遅延が観察された。また、紫外線照射コラーゲンをコートしたリンパ管内皮細胞では、細胞遊走の抑制が観察された。すなわち、紫外線によって変性したコラーゲンは、リンパ管内皮細胞の足場形成を抑制させた。したがって、皮膚における細胞外マトリックスの変化はリンパ管の機能に影響を及ぼしている可能性が考えられた。