三次元培養系ヒト皮膚線維芽細胞を用いた光老化による真皮成分mRNA発現の検討

使用三维培养的人真皮成纤维细胞检查光老化引起的真皮成分 mRNA 表达

• 批准号: 10770385
• 负责人: 横山 洋子
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770385/
• 关键词: UVA; 細胞外基質; RT-PCR; 老化

皮膚の老化をもたらす加齢および紫外線の細胞外基質代謝に与える影響みるため、継代数3〜5代の培養線維芽細胞を三次元培養し、真皮成分であるcollagen α1(I)、collagenase、elastin、elastase、decorinおよびversicanのmRNA発現をRT-PCRによって半定量した。加齢による老化については、若年者(11歳、12歳)と高齢者(75歳、77歳)から得た線維芽細胞を比較したが、いずれも明らかな差異は認めなかった。他方、若年者(22歳)より得た線維芽細胞を継代し、3代と9代の線維芽細胞について比較したところ、9代の細胞では3代よりcollagen α1(I)、elastin、decorin 、versicanのmRNA発現が増加していた。単層培養系と同様に本培養系でも、継代数の少ないものは多いものに比べて、細胞増殖能が高く、従って早期に定常状態に入ってしまうことが推定される。9代の線維芽細胞の細胞外基質のメッセージの増加は、3代の細胞ではすでに安定した状態にあるが、9代ではゆっくりと増殖を続けている途中であるために、細胞外基質産生が高いと考えた。紫外線による老化(光老化)については、同一者2例の日光露光部と非露光部皮膚から得た線維芽細胞について検討したが明らかな差異は認めなかった。若年者(11歳)と高齢者(77歳)から得た線維芽細胞に室温で10J/cm^2の長波長紫外線(UVA)を照射し比較したところ、両者の最も大きな反応性の違いは、高齢者由来細胞におけるcollagenase mRNA発現の亢進、elastase mRNA発現の抑制であった。若年者では逆の変化を示した。今後、UVA照射に対する基質分解系酵素のmRNA発現の違いを蛋白レベルで確認することが必要である。さらにこの系を用いて光老化を予防する薬剤のスクリーニングのシステムを確立する予定である。

The expression of collagen α1(I), collagenase, elastin, elastase, decorin, and versican mRNA in cultured cells of 3 ~ 5 passages of skin aging was semi-quantified by RT-PCR. The age of the elderly (11 years, 12 years) and the age of the elderly (75 years, 77 years) are different from each other. The expression of collagen α1(I), elastin, decorin and versican mRNA increased in the 22-year-old and 22-year-old line germ cells from generation 3 to generation 9. In the same culture system, the number of cells in the culture system is less than that in the culture system, and the number of cells in the culture system is more than that in the culture system. The cell proliferation ability is higher than that in the culture system, and the steady state of the culture system is higher than that in the culture system. The growth of extracellular matrix in the 9 th generation and 3 rd generation cells was stable, and the growth of extracellular matrix in the 9 th generation was high. UV aging (photoaging) is the same in 2 cases of sunlight exposure and non-exposure skin. If the age (11 years old) and the age (77 years old) are exposed to long-wavelength ultraviolet rays (UVA) of 10J/cm^2 at room temperature, the age of 10 J/cm^2 is the highest, and the age of 77 is the highest. If you are old, you will not be able to change. In the future, it is necessary to confirm the mRNA expression of matrix decomposing enzymes in response to UVA irradiation. This system is used to prevent photoaging.