Detection, quantification, and isolation of Escherichia coli O157 by using flow cytometry and fluorescence-activated sorting

使用流式细胞术和荧光激活分选对大肠杆菌 O157 进行检测、定量和分离

• 批准号: 23860003
• 负责人: ISHII Satoshi
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23860003/
• 关键词: 大腸菌O157; 水系感染症; フローサイトメトリ; セルソーティング; FACS; 病原性大腸菌; 一細胞分離; 蛍光抗体; 病原細菌; 大腸菌0157; 汚染源特定

Pathogenic bacteria in irrigation water may attach to vegetables and can cause foodborne diseases. For safe water and food supply, sources of pathogen contamination should be identified and removed. To identify the sources of pathogens, specific detection and isolation of live pathogens is necessary. The objectives of this study were to develop a method to specifically detect and isolate pathogenic bacteria from environmental water samples by using flow cytometry and fluorescence-activated cell sorting (FCM-FACS). We used fluorescence-labeled anti-O157 antibodies to specifically detect E. coli O157 cells. Detected cells were individually sorted and grown in a medium in 96-well plates, and their identities were confirmed as E. coli O157. Even when the proportion of O157 cells in O157/K12 cell mixture was as low as 0.01%, we could specifically detect O157 cells. In addition, we could detect O157 cells present at 10 cells/ml in environmental water samples. Isolated cells can be used to identify their origins by comparing their characteristics to those in known-source E. coli O157 databases.

灌溉水中的致病细菌可能附着在蔬菜上并导致食源性疾病。为了安全的水和食品供应，应查明并消除病原体污染源。为了确定病原体的来源，需要对活病原体进行特异性检测和分离。本研究的目的是开发一种使用流式细胞术和荧光激活细胞分选术 (FCM-FACS) 从环境水样中特异性检测和分离病原菌的方法。我们使用荧光标记的抗 O157 抗体来特异性检测大肠杆菌 O157 细胞。检测到的细胞被单独分选并在96孔板的培养基中生长，其身份被确认为大肠杆菌O157。即使当O157/K12细胞混合物中O157细胞的比例低至0.01%时，我们也可以特异性地检测到O157细胞。此外，我们还可以检测到环境水样中 O157 细胞的含量为 10 个细胞/毫升。通过将分离的细胞的特征与已知来源的大肠杆菌 O157 数据库中的特征进行比较，可以使用分离的细胞来识别其起源。

项目成果

フローサイトメトリーによる生きた病原性大腸菌O157の特異的検出および分離

流式细胞仪特异性检测和分离活致病性大肠杆菌 O157

• 发表时间: 2012
• 作者: 小澤就志;石井聡;岡部聡
• 通讯作者: 岡部聡

環境水中からのFCM-FACSを用いた大腸菌O157の単離手法の開発

使用 FCM-FACS 开发从环境水中分离大肠杆菌 O157 的方法

• 发表时间: 2013
• 作者: 小澤就志;石井聡;岡部聡
• 通讯作者: 岡部聡

Detection of enteropathogenic Escherichia coli 0157 with flow cytometry

流式细胞仪检测致病性大肠杆菌0157

• 发表时间: 2012
• 作者: Ozawa;S.;Ishi,S.;Okabe;S.
• 通讯作者: S.

Detection, quantification and isolation of Escherichia coli O157 with flow cytometry and fluorescence-activated sorting

使用流式细胞术和荧光激活分选对大肠杆菌 O157 进行检测、定量和分离

• 发表时间: 2012
• 作者: Ozawa;S.;Ishi;S.;and Okabe;S
• 通讯作者: S

Detection of enteropathogenic Escherichia coli O157 with flow cytometry.

用流式细胞仪检测致病性大肠杆菌 O157。

• 发表时间: 2012
• 作者: Ozawa;S.;Ishi;S.;and Okabe;S.
• 通讯作者: S.