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ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤誘導microRNA解析による新規癌治療法の開発

利用组蛋白脱乙酰酶抑制剂诱导的 microRNA 分析开发新的癌症治疗方法

基本信息

批准号：
23890031
负责人：
星野敢
金额：
$ 2.08万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011-08-24 至 2013-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23890031/
关键词：
microRNA miR-375 histone deacetylase inhibitor CHAP31 LDHB MTDH ESCC

项目摘要

食道癌は今日においても予後不良な難治性の癌として認識されている。その治療成績の改善には新規の診断方法や治療法の開発が望まれる。今回我々は食道癌においてアセチル化にて誘導されるmicroRNA(miRNA)を同定し、その機能解析を施行することによって癌における発現意義を解析しさらに臨床応用を目指した検討を行うこととした。代表的な食道扁平上皮癌細胞株であるTE2とT.Tnを用いて検討を行った。TE2とT.Tnにhybrid型のhistone deacetylase inihibitor(HDACI)であるCHAP31をIC50の濃度にて暴露した。その後細胞よりtotal RNAを抽出しmicroRNAの発現プロファイリングを施行した。その結果miR-375がCHAP31の暴露群においていずれの細胞においても500倍以上の発現上昇を認めることを確認した。そのため実際に臨床検体20例を用いて、癌部、非癌部でのmiR-375の発現を検証したところ、有意差をもって癌部での発現が低下していることが確認された。次いでmiR-375を細胞に導入し機能解析を施行した。TE2、T.Tn双方において増殖能、移動能、浸潤能のいずれもが低下することが確認されmiR-375が食道扁平上皮癌において強力な抗腫瘍効果を有することが示唆された。さらにmiR-375のターゲットを検索するために、miR-375導入による遺伝子発現変動をmicroarrayを用いた網羅的解析にて施行した。その結果、その結果複数の候補遺伝子が同定されたがTargetscanを用いた検索にてLDHBとMTDHが候補遺伝子として抽出された。実際双方の遺伝子発現はreal-time PCRでの検証の結果、癌部において有意に発現が亢進していることが確認された。また免疫組織学的検証において蛋白レベルでの検証も行ったところやはり癌部において著明に発現レベルが亢進していることが確認された。LDHBの機能解析をsiRNAの手法で施行したところ、増殖能、侵潤能ともに低下し、LDHBが食道扁平上皮癌にて癌遺伝子様の機能を有するものと推測された。

Esophageal cancer is a bad disease in the future. I don't know how to treat esophageal cancer. It is necessary to improve the treatment of new laws and regulations, and to improve the treatment of new regulations. This time, we need to know that the microRNA (miRNA) is the same as that of the esophagus cancer, and that the machine can analyze the meaning of the cancer. The representative cell line of esophageal flat epithelial carcinoma, TE2 T.Tn cell line, was designated as esophageal flat epithelial carcinoma. TE2 hybrids histone deacetylase inihibitor (HDACI), CHAP31 IC50, exposure. After that, the cell total RNA draws out the microRNA to show that it is necessary to implement the operation. The results showed that the miR-375