放射線照射後の欠失・転座を導くＤＮＡ二本鎖切断修復経路の解析

辐射照射后导致缺失/易位的DNA双链断裂修复途径分析

• 批准号: 25881002
• 负责人: 柴田 淳史
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-08-30 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25881002/
• 关键词: Ionising radiation; NHEJ; Resection; CtIP; BRCA1

NHEJは全細胞周期を通じて働き、HRはS/G2期でのみ働くことが知られている。HRの過程では数百～数千bpのresectionが行われるのに対し、NHEJのみが働くG1期でのresectionは数十～数百bp単位で起こると考えられている。それぞれのresectionの規模は異なるが、resection開始メカニズムは類似していることが想定されるため、HRにおけるresectionを開始する因子であるCtIPのNHEJにおける役割を検討した。ゲノムDNAに部位特異的制限酵素配列であるI-SceI配列導入したNHEJアッセイ系を用いることにより、CtIPノックダウン細胞におけるNHEJ後の連結配列をシーケンス解析により行った。コントロール細胞では数十～数百bpの大きさの欠失変異が認められたことから、一部のNHEJではDSB末端のプロセシングとは異なるresectionを介したNHEJが行われていることが示唆された。また、CtIPノックダウン細胞では欠失変異頻度の低下が認められた。欠失変異頻度の減少はresectionの低下を示唆している。さらにCtIPと相互作用する分子BRCA1のノックダウン細胞についても同様な系を用い解析を行ったところ、欠失変異の低下が認められた。以上の結果から、HR同様、G1期のNHEJにおいてもCtIPやBRCA1がresectionを促進している可能性が示唆された。

NHEJ is a complete cell cycle, HR is a S/G2 phase, and NHEJ is a complete cell cycle. HR process is hundreds to thousands of bp of resolution, NHEJ process is tens to hundreds of bp of resolution. The size of the search is different. The search starts. The search starts. DNA site-specific restriction enzyme alignment: I-SceI alignment: NHEJ alignment: CtIP alignment: NHEJ alignment: A few tens to hundreds of bp of DNA are missing from the NHEJ, and a portion of the DNA is missing. CtIP is the most common type of cell in the world. The frequency of the defect decreases, and the defect decreases. CtIP and interaction between molecules BRCA1 and CtIP can be used to analyze the same system, and the difference between CtIP and BRCA1 can be recognized. The above results indicate the possibility of HR identity, G1 NHEJ, CtIP and BRCA1 resections.

项目成果

欠失及び転座を導くG1(G0)期細胞のDSB end resection機構

DSB 终止 G1 (G0) 期细胞的切除机制导致缺失和易位

• 发表时间: 2014
• 作者: 山本英明;谷井孝至;庭野道夫;平野愛弓;齋藤優子・劉庭秀・安東元吉;松村亮佑，平野愛弓，山本英明，庭野道夫;柴田淳史
• 通讯作者: 柴田淳史