補体C1qによるシナプス除去機能の新規制御メカニズムの解明

阐明补体 C1q 突触去除功能的新调节机制

• 批准号: 25893233
• 负责人: 鈴木 邦道
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-08-30 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25893233/
• 关键词: 神経科学; シナプス; C1q; 補体; cerebellin; synapse elimination; 小脳

研究計画に掲げた【課題１】補体によるシナプス除去現象の時空間制御メカニズムの解明については、補体C1qの遺伝子群のクローニングおよび発現をほぼ完了し、検出可能な抗体を選別することができた。また内因性のC1qおよびC3についてもノックアウトマウスを用いた比較検討から、検出可能な抗体および染色方法を確立したことで、メカニズム探索の遂行に必要なツールを得ることができた。C1qの受容体の探索やC1qの神経細胞への結合性に変化を与える刺激の探索についても検討を行い、C1qが結合する条件を見出しつつある。一方で、補体によるシナプス除去現象を再現するために補体C1qおよびC3のノックアウトマウスを用いて、両側の網膜神経節細胞から外側膝状体への投射に異常が見られるか否か検討したところ、既報とは異なり野生型マウスとの差異を見出せなかった。現在、既報の真偽を確かめるために再現実験を行うと同時に追加の確認実験を計画している。【課題２】内因性の補体が正常発達段階において引き起こすシナプス除去に対して介入する系の確立、については、シナプス形成を強制的に生じさせるために、Cerebellin1（Cbln1）とNeuronal pentraxin1（NPTX1）の部分配列を結合させたキメラタンパク質CPTX1を処理する実験を行った。その結果、小脳顆粒細胞とAMPA型受容体を発現する非神経細胞との間に人工的にシナプスを形成させることに成功した。またこのキメラタンパク質をCbln1欠損マウスの小脳に投与したところ、興味深いことに運動失調の一部を改善することができた。

The research project reveals that complement C1q can be detected by detecting possible antibody selection in the time-space control system of complement C1q. C1q and C3q are used to compare and detect possible antibodies and staining methods to establish and explore the necessary procedures. C1q receptor exploration, C1q neuronal binding, and stimulation exploration, C1q binding, and conditions are revealed. The deletion of complement C1 and complement C3 was repeated in one side and complement C1 and complement C3 in the other side. The projection abnormality of lateral geniculate body in retinal ganglion cells was observed in both sides. Now, since the authenticity of the report is true, the reproduction is true, and the confirmation is true, the plan is added [Topic 2] Internal complement is normally developed in stages, and the system is established, the system is formed, and the partial alignment of Cebellin 1 (Cbln1) and Neuronal pentaxin 1 (NPTX1) is combined. As a result, small granular cells and AMPA-type receptors have been successfully developed in non-neuronal cells and in artificial cells. A part of the movement disorder is improved.