ケミカルバイオロジーに基づく植物ウイルス病治療薬の網羅的同定

基于化学生物学的植物病毒病治疗剂综合鉴定

• 批准号: 26892012
• 负责人: 岡野 夕香里
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26892012/
• 关键词: オオバコモザイクウイルス

植物ウイルスは農業生産に甚大な被害を及ぼすが、菌類や細菌に対して通常行われるような農薬スクリーニングを行なうことはできず、これまでに有効な農薬は開発されていない。本研究では、ウイルスの増殖を阻害する化合物を化合物ライブラリーの中から網羅的に特定することを目的としている。平成２６年度はまずウイルスの増殖を阻害する化合物のスクリーニングを行うのに最適なハイスループットな系の検討を行った。シロイヌナズナの培養細胞からプロトプラストを抽出し、GFP 付加したオオバコモザイクウイルス (PlAMV) の感染性クローン(PlAMV-GFP) とポリエチレングリコールを加えてウイルス接種をおこない、ウイルス増殖に伴ってGFP蛍光が観察されることを確認した。次に、大量のサンプルを簡便に処理できるよう、96穴マイクロタイタープレートを用いて同様の実験を行い、GFP蛍光を蛍光プレートリーダーで全サンプルで安定して定量出来る条件の検討を行った。また、PlAMV以外の数種のウイルスについてもGFPを付加した感染性クローンを構築し同様の接種試験と検出条件の検討を行った。また、ウイルスを接種するだけで、細胞が死にGFP蛍光が減少する可能性を排除するため、接種後に生細胞・死細胞同時染色試薬で染色し、蛍光プレートリーダーによって試薬に由来する蛍光を定量することで生細胞と死細胞の割合を計測し、顕微鏡によって細胞形態を観察し、細胞形態が正常であるかどうかを確認した。

Agricultural production plant ウ イ ル ス は に great な murdered を and ぼ す が bacteria and fungi や に し seaborne て line usually わ れ る よ う な farmers 薬 ス ク リ ー ニ ン グ を line な う こ と は で き ず, こ れ ま で に have sharper な farmers 薬 は open 発 さ れ て い な い. This study で は, ウ イ ル ス を の raised colonization resistance against す る compounds を ラ イ ブ ラ リ ー の in か ら snare に specific す る こ と を purpose と し て い る. Pp.47-53 26 year は ま ず ウ イ ル ス を の raised colonization resistance against す る compound の ス ク リ ー ニ ン グ を line う の に optimum な ハ イ ス ル ー プ ッ ト な is の 検 line for を っ た. シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ の culture cell か ら プ ロ ト プ ラ ス ト を spare し, GFP pay し た オ オ バ コ モ ザ イ ク ウ イ ル ス (PlAMV) の infectious ク ロ ー ン (PlAMV - GFP) と ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル を plus え て ウ イ ル ス vaccination を お こ な い, ウ イ ル に ス raised colonization with っ て GFP 蛍 light が 観 examine さ れ る こ と を confirm し た. Time に, massive の サ ン プ ル を simple に 処 Richard で き る よ う, 96 holes マ イ ク ロ タ イ タ ー プ レ ー ト を with い て with others の be 験 を い, GFP 蛍 light を 蛍 light プ レ ー ト リ ー ダ ー で full サ ン プ ル で settle し て condition る quantitative out の 検 line for を っ た. ま た, PlAMV の several の ウ イ ル ス に つ い て も GFP を plus し た infectious ク ロ ー ン を build し with others の inoculation test と 検 condition の 検 line for を っ た. ま た, ウ イ ル ス を vaccination す る だ け が で, cells die に GFP 蛍 light が reduce す る を ruled out す る た め に born dead cells, cells at the same time, after dyeing test 薬 で dyeing し, 蛍 light プ レ ー ト リ ー ダ ー に よ っ て try 薬 に origin す る 蛍 light を quantitative す る こ と で born cells と die cut close を の measuring し, 顕 micromirror に よ っ て cell shape The state を観 examination of <s:1> and the cell morphology が are normal. Youdaoplaceholder2 う う を を confirm that た た.

项目成果

Cell Death Triggered by a Putative Amphipathic Helix of Radish mosaic virus Helicase Protein Is Tightly Correlated With Host Membrane Modification.

• DOI: 10.1094/mpmi-01-15-0004-r
• 发表时间: 2015-06
• 期刊: Molecular plant-microbe interactions : MPMI
• 作者: M. Hashimoto;K. Komatsu;Ryo Iwai;T. Keima;K. Maejima;Takuya Shiraishi;K. Ishikawa;Tetsuya Yoshida;Yugo Kitazawa;Yukari Okano;Y. Yamaji;S. Namba

plantago asiatica mosaic virusのTGBp1はホモオリゴマーを形成しSGS3/RDR6 bodyを凝集させる

车前子花叶病毒的TGBp1形成同源寡聚物并聚集SGS3/RDR6体

• 发表时间: 2015
• 作者: Yusuke Sakai;Takahiro Matsuda;Goichiro Hanaoka;岡野夕香里・遊佐礼・薦田（萩原）優香・桂馬拓也・二條貴通・小松健・山次康幸・難波成任
• 通讯作者: 岡野夕香里・遊佐礼・薦田（萩原）優香・桂馬拓也・二條貴通・小松健・山次康幸・難波成任