新規基材と機能性タンパク質を用いた弾性線維の三次元的再生医療の実用化

新型基础材料和功能蛋白弹性纤维三维再生医学的实际应用

• 批准号: 16H02683
• 负责人: 鈴木 茂彦
• 金额: $ 16.31万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H02683/
• 关键词: 皮膚の再生医療; 再生医療; 移植・再生医療; 臨床; 細胞・組織

まず、ウサギ線維芽細胞が弾性線維形成能を持つことを確かめるため、弾性線維が豊富に存在する真皮浅層から線維芽細胞を採取した。また、強力な弾性線維形成促進作用を持つことがわかっているヒトのLTBP-4＋LAP-TGF-beta1タンパク質を用いて、2次元培養でウサギの線維芽細胞が弾性線維を形成することができるかどうかを実験した。その結果、ヒトのLTBP-4＋LAP-TGF-beta1を添加した場合に弾性線維の形成が見られたが、ヒト新生児由来の線維芽細胞に比べると少量であった。次に、ウサギへの移植実験として、コラーゲンスポンジに細胞を播種したものに、①リコンビナントタンパク質添加なし群、②ヒトLTBP-4添加群、③ヒトLTBP-4＋LAP-TGF-beta1添加群、の3群で実験を行った。また3次元培養に用いるコラーゲンスポンジは小孔径スポンジと大孔径スポンジの両者を用いて比較検討した。9週齢日本白色家兎の背部真皮中層に各群のスポンジを埋入した。移植部位の確認のため、あらかじめ線維芽細胞に蛍光色素標識を行った。6週後に移植部皮膚を採取しEVG染色を行ったところ、いずれの群も弾性線維の再生は見られなかった。LTBP-4＋LAP-TGF-beta1添加群では、コラーゲン線維の形成が著明に増加していた。一方、臨床応用へ向けてLTBP-4含有コラーゲンスポンジの試作を行い、in vitroでその評価を行った。作製方法はリコンビナントLTBP-4水溶液を含んだコラーゲンスポンジを凍結乾燥させ滅菌した。これを用いてヒト皮膚線維芽細胞の3次元培養を行った。3週間後に凍結切片を作製し、エラスチンの免疫染色を行って弾性線維の形成を評価したところ、LTBP-4を含有させていないコラーゲンスポンジ群と比較して、LTBP-4を含有させたコラーゲンスポンジ群では、弾性線維の形成が促進されることが確認できた。

In addition, it is possible to maintain the ability of the formation of sexual thread in the superficial dermis of the dermis. LTBP-4 + LAP-TGF-beta1 can be used to promote the formation of strong linear dimension in cells cultured in 2D. In addition to LTBP-4 + LAP-TGF-beta1, the formation of new line cells was observed in a small amount. In addition, it is necessary to establish the following three groups: (1) the group of cell transplantation,(2) the group of LTBP-4 addition,(3) the group of LTBP-4 + LAP-TGF-beta1 addition, and (4) the group of cell transplantation. 3-D culture with small pore size and large pore size 9 weeks old Japanese white house back dermis middle layer of each group The identification of the transplanted site and the identification of the photochrome in the cells of the vascular buds. After 6 weeks, EVG staining was performed on the skin of the transplanted part. LTBP-4 + LAP-TGF-beta1 additive groups are formed in the presence of light. LTBP-4 is a prescription for clinical use. It contains three components: test and evaluation. The preparation method includes freezing, drying and sterilizing LTBP-4 aqueous solution 3-D culture of cells in the skin line. After 3 weeks, frozen sections were prepared and immunostained to promote the formation of the sex line. LTBP-4 was found to contain the sex line. LTBP-4 was found to promote the formation of the sex line.

项目成果

弾性線維再生の実用化を目指して

致力于弹性纤维再生的实际应用

• 发表时间: 2017
• 作者: 綾梨乃;野田和男;内藤素子;坂元悠紀;平嗣良;中邨智之;鈴木茂彦
• 通讯作者: 鈴木茂彦

コラーゲン足場基材を用いた弾性線維再生医療の開発

使用胶原蛋白支架基材开发弹性纤维再生医学

• 发表时间: 2016
• 作者: 野田和男;綾梨乃;内藤素子;中邨智之;平嗣良;鈴木茂彦
• 通讯作者: 鈴木茂彦

京都大学医学研究科 形成外科 研究項目 創傷治癒 弾性線維

京都大学大学院医学研究科整形外科、研究项目、伤口愈合、弹性纤维

LTBP-4複合化基材における線維芽細胞の培養で弾性線維の再生が促進される

LTBP-4复合基质上培养成纤维细胞促进弹性纤维再生

• 发表时间: 2017
• 作者: Watanabe Y;Honda S;Konishi A;Satoko Arakawa S;Murohashi M;Yamaguchi H;Torii S;Tanabe M;Tanaka S;Warabi E;Shimizu S.;綾梨乃,野田和男,中邨智之,平嗣良,坂元悠紀,鈴木茂彦
• 通讯作者: 綾梨乃,野田和男,中邨智之,平嗣良,坂元悠紀,鈴木茂彦

弾性線維組織再生基材及び弾性線維組織再生基材の製造方法

弹性纤维组织再生基材及其制造方法

• 发表时间: 2017