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遺伝子ノックアウト技術で拓く幼若ホルモン研究の新展開

利用基因敲除技术保幼激素研究新进展

基本信息

批准号：
25252059
负责人：
篠田徹郎
金额：
$ 24.13万
依托单位：
National Institute of Agrobiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25252059/
关键词：
ゲノム編集幼若ホルモン変態カイコノックアウト TALEN 脱皮

项目摘要

平成26年度は、以下の解析を行った。1. "JHフリー"のカイコの解析： JHAMTとCYP15C1遺伝子のダブルミュータントカイコについて、表現型解析を完了させた。2. JH受容体ノックアウトカイコの解析： Met1, Met2シングルノックアウト、およびダブルノックアウトカイコの表現型解析を完了させた。3. カイコの遺伝的モザイク系統を利用してMet1のモザイク解析を行った。4. 以上の結果から、幼若ホルモンが機能しないカイコにおいても、基本的に蛹への変態は3齢になるまで起こらないことを実験的に証明することができた。5. "competence"獲得メカニズムの解析: 1, 2齢のカイコが蛹変態できない理由を明らかにするために、種々のノックアウトカイコにおける遺伝子発現解析を行った。その結果、蛹化の鍵遺伝子であるbroadが、JHが無い状態にも関わらず、若齢では発現の上昇が見られないことが判明した。さらに、broadのモザイク解析を行い、broadが真皮細胞の蛹化に必須であることを明らかにした。以上の結果から、カイコの若齢期においては、broadの誘導に必要な条件が満たされないために、蛹変態が起きないことが推定された。おそらく、カイコには蛹に変態するための能力を与える因子("competence factor")が存在し、その効果は3齢期以降でないと表れないものと考えられる。6. 幼虫・蛹化・成虫化のマスター遺伝子の解析：幼虫形質維持・蛹化・成虫化の鍵遺伝子としてそれぞれkr-h1, broad, E93が提案されている。ゲノム編集法を用いた解析により、カイコの真皮細胞においてもこれらの遺伝子は幼虫形質維持・蛹化・成虫化に必須であることを明らかにした。これらの遺伝子のモザイク個体は致死性が極めて高く、ノックアウト系統を得ることが困難であったが、適切な条件を見いだすことで、ノックアウト系統の樹立に成功した。

26 years ago, the following analysis was carried out. 1. "JH" analysis: JHAMT CYP15 C1 gene analysis, phenotype analysis completed 2. JH receptor analysis: Met1, Met2, Met 3, Met 4, Met 5, Met 6, Met 7, Met 8, Met 9, Met 9 3. The analysis of the information in the database is carried out by using the database. 4. The above results show that the basic functions of the system are as follows: 5. "competence" is obtained by analyzing: 1, 2 As a result, the key to the transformation is broad, JH is not in the state, and if it is not in the state, it is clear. In the meantime, broad analysis of dermal cells is necessary. The above results show that the necessary conditions for the induction of broad, broad and broad conditions are established. The ability of a person to change his or her behavior ("competency factor") is a factor that affects the ability of a person to change his or her behavior. 6. Analysis of larval, mature and adult genetic inheritance: larval morphological maintenance, mature and adult genetic inheritance is proposed by kr-h1, broad, E93 The method of compilation is used to analyze the dermal cells of the ovary, the ovary and the ovary, and to maintain the morphology of the ovary and larva. The individual lethality of the virus is extremely high and the system is difficult to establish under appropriate conditions.