筋ジストロフィー原因蛋白によるジストログリカン糖鎖修飾とECMとの関係

肌营养不良症蛋白的肌营养不良糖基化与 ECM 之间的关系

• 批准号: 14580634
• 负责人: 田島 陽一
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14580634/
• 关键词: 筋ジストロフィー; 縁取り空胞型遠位ミオパチー; 糖鎖異常; リソソーム; エンドソーム; UDP-GlcNAc 2-epimerase; オートファゴソーム; 筋ジストロフイー; α-dystroglycan; α-dystroglycanopathy; 糖鎖形成不全; myd変異マウス; 糖転移酵素; LARGE蛋白質

縁取り空胞型遠位ミオパチー(DMRV)は日本で初めに報告された筋疾患で、日本人に多くの患者が存在する。最近、DMRVの責任遺伝子がクローニングされ、UDP-GlcNAc 2-epimerase/ManNAc kinase(UDP-GlcNAc 2-epimerase)遺伝子であることが明らかとなった。DMRVの原因遺伝子のUDP-GlcNAc 2-epimeraseはCMP-シアル酸の生合成系の重要な酵素であるため、DMRVおよびHIBMではシアル酸を還元末端に持つ糖鎖が減少することが予想されている。まず、DMRV患者生検筋組織での糖蛋白質の糖鎖変化について調べるために、各種レクチンを使用して、5家系6人のDMRV患者の凍結筋切片の蛍光組織染色を行った。その結果、DMRV患者ではPNA(Galβ1-3GalNAcに結合)により強染するのに対して、対照においては陰性であった。その他のレクチンにおいて両者で差は見られなかった。また、PNAの染色は筋細胞膜に局在するパターンを示した。さらに、レクチンブロットにおいても確認した。このことから、DMRV患者の骨格筋では、PNAで認識される糖鎖変化が起きていることが示唆された。DMRVではリソソーム/エンドソームまたはオートファゴソームの機能亢進と考えられる縁取り空が存在する。そこで、後期エンドソームのマーカーであるLAMP-1,LAMP-2,LIMP-1,LIMP-2,およびEndolyn/CD164に対する抗体を用いて凍結筋切片を蛍光免疫染色した。その結果、いずれの抗体もDMRV患者の筋細胞質において顆粒状の強い染色が見られ、特に縁取り空胞の存在する変性筋繊維では著しい傾向にあった。このことはDMRV患者の筋組織においては、リソソーム/エンドソームまたはオートファゴソーム機能亢進の可能性が示唆された。今後、DMRVでの糖蛋白質の糖鎖異常とリソソーム/エンドソームまたはオートファゴソーム機能亢進との病態解明が重要になるだろう。

Try take り empty cell type as a ミ オ パ チ ー (DMRV) は Japan early で め に report さ れ で た muscle disease, more than the Japanese に く の patients が す る. Recently, DMRV の responsibility heritage 伝 son が ク ロ ー ニ ン グ さ れ, UDP - GlcNAc 2 - epimerase/ManNAc kinase (UDP - GlcNAc 2 - epimerase) heritage 伝 son で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. Cause of DMRV の survived 伝 の UDP - GlcNAc 2 - epimerase は CMP - シ ア ル acid の raw GeChengXi の important な enzyme で あ る た め, DMRV お よ び HIBM で は シ ア ル acid を つ lock が reducing sugar is yuan end に す る こ と が to think さ れ て い る. ま ず, DMRV patients 検 muscle tissue で の sugar protein の sugar - turn lock に つ い て adjustable べ る た め に, various レ ク チ ン を use し て, five six の DMRV の freeze in patients with muscle biopsy の 蛍 light line organization dyeing を っ た. そ の results, DMRV で は PNA (Gal beta 1-3 galnac に) に よ り strong dye す る の に し seaborne て, polices according to に お い て は negative で あ っ た. Youdaoplaceholder0 った he レ レ チ チ にお にお て て the two で difference った see られな にお った った. Youdaoplaceholder0 and PNA <s:1> staining of the fascia cell membrane に is localized in するパタ and <s:1> を を, indicating <s:1> た. Youdaoplaceholder0, レ チ チ チ ブロットにお て て て confirm た た. こ の こ と か ら, DMRV の patients with skeletal muscle で は, PNA で know さ れ る sugar - turn が lock up き て い る こ と が in stopping さ れ た. DMRV で は リ ソ ソ ー ム / エ ン ド ソ ー ム ま た は オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム の hyperfunction と exam え ら れ る try take り empty が exist す る. そ こ で, late エ ン ド ソ ー ム の マ ー カ ー で あ る LAMP 1, LAMP 2, LIMP - 1, LIMP - 2, お よ び Endolyn/CD164 に す seaborne を る antibody with い て freeze muscle biopsy を 蛍 light immune dyeing し た. そ の results, い ず れ の antibody も の DMRV patients muscle cytoplasm に お い て granular の strong い dyeing が see ら れ, に try take り empty cell の exist す る - sex reinforcement 繊 d で は the し い tendency に あ っ た. こ の こ と は DMRV の muscle tissue in patients with に お い て は, リ ソ ソ ー ム / エ ン ド ソ ー ム ま た は オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム hyperfunction が の possibility in stopping さ れ た. In the future, DMRV で の sugar protein の sugar abnormal lock と リ ソ ソ ー ム / エ ン ド ソ ー ム ま た は オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム hyperfunction と の pathological interpret が important に な る だ ろ う.

项目成果

Kotani M, Osanai T, Tajima Y, et al.: "Identification of neuronal cell lineage-specific molecules in the neuronal differentiation of P19 EC cells and mouse central nervous system."J Neurosci Res. 67. 595-606 (2002)

Kotani M、Osanai T、Tajima Y 等人：“P19 EC 细胞和小鼠中枢神经系统神经元分化中神经元细胞谱系特异性分子的鉴定。”J Neurosci Res。

M.Kotani, Y.Tajima, et al.: "Complementary DNA cloning and characterization of RANDAM-2, a type-I membrane molecule specifically expressed on glutamatergic neuronal cells in the mouse cerebrum."J.Neurosci.Res.. 73. 603-613 (2003)

M.Kotani、Y.Tajima 等人：“RANDAM-2 的互补 DNA 克隆和表征，RANDAM-2 是一种在小鼠大脑谷氨酸能神经元细胞上特异性表达的 I 型膜分子。”J.Neurosci.Res. 73。

Kanai-Azuma M, Kanai Y, Gad JM, Tajima Y, Taya C, et al.: "Depletion of definitive gut endoderm in Sox17-null mutant mice"Development. 129. 2367-2379 (2002)

Kanai-Azuma M、Kanai Y、Gad JM、Tajima Y、Taya C 等人：“Sox17 缺失突变小鼠定形肠内胚层的消耗”开发。

Shimoda Y, Tajima Y, Osanai T, et al.: "Pax6 controls the expression of Lewis x epitope in the embryonic forebrain by regulating alpha 1,3-fucosyltransferase IX expression."J Biol Chem. 277. 2033-2039 (2002)

Shimoda Y、Tajima Y、Osanai T 等人：“Pax6 通过调节 α 1,3-岩藻糖基转移酶 IX 的表达来控制胚胎前脑中 Lewis x 表位的表达。”J Biol Chem。

M.Kotani, Y.Tajima, et al.: "Complementary DNA cloning and characterization of RANDAM-2, type-I membrane molecule specifically expressed on glutamatergic neural cells in the mouse cerebrum."J.Neurosci.Res.. 73. 603-613 (2003)

M.Kotani、Y.Tajima 等人：“RANDAM-2（在小鼠大脑谷氨酸神经细胞上特异性表达的 I 型膜分子）的互补 DNA 克隆和表征。”J.Neurosci.Res.. 73. 603