Analysis of molecular basis of mouse prefrontal cortex function

小鼠前额皮质功能的分子基础分析

• 批准号: 16500239
• 负责人: MORI Hisashi
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: University of Toyama (2005)Toyama Medical and Pharmaceutical University (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16500239/
• 关键词: mouse; prefrontal cortex; glutamate receptor; BAC; gene manipulation; Cre; NMDA受容体; 記憶・学習

This research aimed to clarify a molecular basis of prefrontal cortex function in the learning process by using the gene manipulation mouse. To manipulate the gene function in the mouse prefrontal cortex-selective manner, we first screened prefrontal cortex-selective expressing genes by suppressive subtractive hybridization method. Then, we confirmed the prefrontal-selective expression of the dopamine D4 receptor gene by the mRNA in situ hybridization. Next, we obtained the bacterial artificial chromosome (BAG) including the mouse genomic D4R gene from the CHORI BACPAC resources. We improved the method of homologous recombination in E.coli.and established the efficient protocol for constructing the BAC-based transgenic vector and gene targeting vector (TV) in embryonic stem (ES) cells. Using our improved protocol, we introduced the dominant negative NMDA-type glutamate receptor subunit GluRζ(N/R) in the D4R locus of the BAG. We have tried to introduce modified D4R BAG into the mouse prefrontal cortex by the DNA electroporation, and we also tried to establish the transgenic mouse of modified D4R-BAC and ES cells.

本研究旨在通过基因操作小鼠阐明学习过程中前额叶功能的分子基础。为了在小鼠前额叶皮层选择性表达中操纵基因功能，我们首先采用抑制性消减杂交方法筛选了前额叶皮层选择性表达基因。然后，我们证实了多巴胺D4受体基因的前额叶选择性表达的mRNA原位杂交。接下来，我们从CHORI BACPAC资源中获得了包含小鼠基因组D4 R基因的细菌人工染色体（BAG）。我们改进了大肠杆菌中同源重组的方法，建立了高效的BAC转基因载体和胚胎干细胞中基因打靶载体（TV）的构建方法。使用我们的改进方案，我们引入了显性负性NMDA型谷氨酸受体亚基GluR（N/R）的D4 R位点的BAG。我们尝试通过DNA电穿孔法将修饰的D4 R-BAG导入小鼠前额叶皮层，并尝试建立修饰的D4 R-BAC和ES细胞的转基因小鼠。

项目成果

情動学習の神経機構

情绪学习的神经机制

• 发表时间: 2006
• 期刊: 神経研究の進歩(総説) 50
• 作者: Ando;K.;Nagano;T.;Nakamura;A.;Konno;D.;Yagi;H.;Sato;M;森 寿
• 通讯作者: 森 寿

Direct interaction of Gluδ2 with Shank scaffold proteins in cerebellar Purkinje cells.

Gluδ2 与小脑浦肯野细胞中 Shank 支架蛋白的直接相互作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Mol.Cell.Neurosci. 26
• 作者: Uemura T.;Mori H.;Mishina M.
• 通讯作者: Mishina M.

Direct interaction of GluRδ2 with Shank scaffold proteins in cerebellar Purkinie cells.

GluRδ2 与小脑 Purkinie 细胞中 Shank 支架蛋白的直接相互作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Mol.Cell.Neurosci. 26
• 作者: Uemura T.;Mori H.;Mishina M.
• 通讯作者: Mishina M.

The NMDA receptor GluRε2 is important for delay and trace eyeblink conditioning in mice.

NMDA 受体 GluRε2 对于小鼠的延迟和微量眨眼调节非常重要。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Neurosci. Lett. 364
• 作者: Takehara;K.;et al.
• 通讯作者: et al.

グルタミン酸受容体チャンネルの構造と機能

谷氨酸受体通道的结构和功能

• 发表时间: 2005
• 期刊: 生化学(総説) 77
• 作者: Kato Y;Takatsuki K;Kawahara S;Fukunaga S;Mori H;Mishina M;Kirino Y.;Takahashi Y.Mori H.Mishina M.Watanabe M.Konondo N.Shimomura J.Kubota Y.Matsuda K.Fukushima K.Shiroma N.Akasaka N.Nishida H.Imamura A.Watanabe H.Sugiyama N.Ikezawa M.Fujiwara T.;Takeuchi T.Miyazaki T.Watanabe M.Mori H.Sakimura K.Mishina M.;森 寿
• 通讯作者: 森 寿