NAD依存性ヒストン脱アセチル化酵素SIRT1の心筋細胞における役割

NAD 依赖性组蛋白脱乙酰酶 SIRT1 在心肌细胞中的作用

• 批准号: 17590757
• 负责人: 坂本 淳
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17590757/
• 关键词: ヒストン脱アセチル化酵素; 核内移行シグナル; 核外移行シグナル

1.胎仔心臓と不全心におけるSIRT1の細胞内局在1)発生初期(E12.5)と生後10週の心臓におけるSIRT1の細胞内局在を免疫組織染色法により同定した。SIRT1はE12.5では核に局在していたが、10週では細胞質に分布していた。心臓を核分画と細胞質分画に分けてWestern blottingで調べた実験でも同様の結果が得られた。2)拡張型心筋症モデルハムスター(TO-2ハムスター)を用い、不全心におけるSIRT1の細胞内局在を調べた。33週の心不全発症時にはTO-2ハムスターでは核に局在していたが、wild typeではマウスと同様に細胞質に分布していた。2.SIRT1の核-細胞質間移行COS7細胞にGFP融合SIRT1を一過性発現させると核に局在する。このCOS7細胞にL929細胞を加えてポリエチレングリコール処理を行なうと細胞融合が生じ、1つの細胞に2種類の核が存在するheterokaryonとなる。このheterokaryonを調べるとL929細胞の核にもGFP融合SIRT1が存在し、SIRT1が核-細胞質間を移動することが明らかとなった。3.SIRT1の核内移行シグナル(NLS)と核外移行シグナル(NES)の同定SIRT1のアミノ酸配列の解析およびSIRT1の欠失変異体・点変異体の細胞内局在の変化の分析により、SIRT1には2つのNLSと2つのNESが存在することが確認された。4.SIRT1によるアポトーシス抑制C2C12細胞に過酸化水素を加えるとアポトーシスが生じるが、核にSIRT1を一過性発現させた細胞ではアポトーシスが抑制される。NLSあるいはヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)活性を持つアミノ酸配列に点変異を導入したクローンには抗アポトーシス効果はみられず、SIRT1によるアポトーシス抑制には核局在性とHDAC活性が重要であることが示された。

1. Tire wang heart perforatien と not whole heart に お け る SIRT1 の bureau at the beginning of the 1) 発 born in cells (E12.5) と 10 weeks after birth の heart viscera に お け る SIRT1 bureau in を の cell immunohistochemical staining method に よ り with fixed し た. The nuclear に of SIRT1 <s:1> E12.5 is distributed in the <s:1> て たが たが たが at 10 weeks and in the に に cytoplasm に at て て た た た. Heart viscera を nuclear points paint と cytoplasm points に け て Western blotting で adjustable べ た be 験 で も with others の results ら が れ た. 2) company, a core muscle disease モ デ ル ハ ム ス タ ー (- 2 ハ ム ス タ ー) を い, not the whole heart に お け る SIRT1 の cells inside bureau in を adjustable べ た. 33 weeks の heart not full 発 disease に は TO - 2 ハ ム ス タ ー で は nuclear に bureau in し て い た が, wild type で は マ ウ ス と with others に cytoplasm に distribution し て い た. 2.SIRT1 has interstitial transition between the nucleus and cytoplasm. COS7 cells にGFP fusion SIRT1を transient occurrence させると nuclear に locality in する. こ の に COS7 cells L929 cell を plus え て ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル 処 Richard を line な う と cell fusion が じ, 1 つ の cells に 2 types の nuclear が す る heterokaryon と な る. こ の heterokaryon を adjustable べ る と の L929 cell nuclear に も GFP fusion SIRT1 が し, SIRT1 が between nuclear and cytoplasmic を mobile す る こ と が Ming ら か と な っ た. 3. The SIRT1 の nuclear internal migration シ グ ナ ル (NLS) と nucleus transitional シ グ ナ ル (NES) with fixed の SIRT1 の ア ミ ノ acid with column の parsing お よ び SIRT1 の owe lost - variants, point 1 - bureau in の の cell - the の analysis に よ り, SIRT1 に は 2 つ の NLS と 2 つ の NES が exist す る こ と が confirm さ れ Youdaoplaceholder0. 4. SIRT1 に よ る ア ポ ト ー シ ス inhibition of C2C12 cells water acidification passes に element を plus え る と ア ポ ト ー シ ス が raw じ る が, nuclear に SIRT1 を transient 発 now さ せ た cells で は ア ポ ト ー シ ス が inhibit さ れ る. NLS あ る い は ヒ ス ト ン ア off セ チ ル phenoloxidase (HDAC) activity を hold つ ア ミ ノ acid with column に points - different を import し た ク ロ ー ン に は resistance ア ポ ト ー シ ス unseen fruit は み ら れ ず, SIRT1 に よ る ア ポ ト ー シ ス inhibit に は nuclear agency in the sexual と HDAC activity が important で あ る こ と が shown さ れ た.

项目成果

Erythropoietin affords additional cardioprotection to preconditioned hearts by enhanced phosphorylation of glycogen synthase kinase-3β

• DOI: 10.1152/ajpheart.00837.2005
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-HEART AND CIRCULATORY PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Nishihara, Masahiro;Miura, Tetsuji;Shimamoto, Kazuaki
• 通讯作者: Shimamoto, Kazuaki

Macrophage colony-stimulating factor treatment after myocardial infarction attenuates left ventricular dysfunction by accelerating infarct repair.

• DOI: 10.1016/j.jacc.2005.09.037
• 发表时间: 2006-02
• 期刊: Journal of the American College of Cardiology
• 影响因子: 24
• 作者: T. Yano;T. Miura;P. Whittaker;T. Miki;J. Sakamoto;Yuichi Nakamura;Y. Ichikawa;Y. Ikeda;Hironori Kobayashi;K. Ohori;K. Shimamoto

Alteration in erythropoietin-induced cardioprotective signaling by postinfarct ventricular remodeling

• DOI: 10.1124/jpet.105.095745
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Miki, T;Miura, T;Shimamoto, K
• 通讯作者: Shimamoto, K