Elucidation of the regulatory mechanism of lipid production in oleaginous yeast

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１．ゲノム比較による油脂生産関連遺伝子同定と機能解析野生株、油脂高蓄積変異株、油脂低蓄積変異株のゲノム比較解析を実施し、油脂蓄積性の原因と考えられる候補遺伝子を複数抽出した。油脂蓄積変異株のゲノム上に存在する変異が導入された候補遺伝子を野生株のゲノム上の正常型の候補遺伝子と置換した株を作製し、その表現型（細胞数、細胞直径、グルコース資化量、油脂生産量、油脂含有率、対糖油脂収率）を評価した。その結果、これまでに野生株の油脂蓄積性を変動させる変異が導入された遺伝子を１つ見いだした。今後はこの遺伝子のアミノ酸配列情報から機能の予測、油脂合成に重要なクエン酸を介したアシルCoA合成経路及びケネディ経路の酵素遺伝子への影響を解析する。２．網羅的遺伝子発現データ解析による油脂生産制御に関わる細胞内因子同定野生株、油脂高蓄積変異株、油脂低蓄積変異株の増殖、糖消費量、油脂生産量の時系列データを取得した。この時系列データから、細胞の状態が変動する時点を検出した。その後、野生株、油脂高蓄積変異株、油脂低蓄積変異株を培養し、この変動点付近を中心とした時系列点で菌体を回収し、RNAを抽出した。その後、抽出したRNAを利用して油脂酵母Lipomyces starkeyiマイクロアレイを利用して網羅的遺伝子発現データを取得した。今後は、取得した網羅的遺伝子発現データを活用して、油脂蓄積に関連している遺伝子の抽出、抽出遺伝子のネットワーク構築による油脂生産制御に関わる細胞内因子の候補抽出を行う。