酵母における蛋白質合成阻害ストレスに対するmRNA安定化制御機構の研究

酵母响应蛋白质合成抑制应激的mRNA稳定控制机制研究

• 批准号: 16780064
• 负责人: 高久 洋暁
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nigata University of Phermacy and Applied Life Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16780064/
• 关键词: Candida maltosa; C-GCN4; C-GCN2; C-CPC2; C-PUB1; シクロヘキシミド; アミノ酸合成普遍制御; リボソーム蛋白質L41; アミノ酸飢餓の普遍的制御; シクロヘキシミド誘導的耐性化機構; uORF

酵母Candida maltosaは蛋白質合成阻害剤であるシクロヘキシミド(CYH)に対して、生育が一時停止した後に再び生育が回復する誘導的耐性を示す。これは、CYH添加後、転写活性化因子C-Gcn4pが、CYH耐性L41リボソーム蛋白質遺伝子(L41-Q)の転写を誘導し、CYH耐性型リボソームが合成されることに起因する。本年度、転写活性化因子C-Gcn4pの活性を制御する候補因子C-CPC2遺伝子とC-GCN4 mRNAの安定性を制御する候補因子C-PUB1遺伝子の2つの遺伝子を取得し、塩基配列を決定した。C-CPC2遺伝子破壊株(Δc-cpc2)を作製し、野生株と生育速度の比較検討を行った結果、CYH非添加時の野生株とΔc-cpc2の生育速度は変わらないのに、CYH添加後のΔc-cpc2の生育速度は野生株と比べて遅くなり、生育の回復に時間を要することが明らかになった。また、野生株とΔc-cpc2におけるCYH添加後のCYH耐性L41リボソーム蛋白質遺伝子の発現レベルを比較した結果、Δc-cpc2は野生株よりも発現量が少ないことが明らかとなった。すなわち、Δc-cpc2細胞内のCYH耐性型リボソーム量が野生株に比べて少ないため、生育の回復に時間を要すると考えられた。また、Δc-cpc2におけるC-GCN4 mRNAレベルは野生株と比較してほとんど変わらないことから、C-Cpc2pはL41-Q mRNAとC-Gcn4pとの結合、或いはC-Gcn4pの転写活性の調節を行う調節因子であることが示唆された。また、C-GCN4 mRNAの安定性を制御する候補因子C-Pub1pとCYH誘導的耐性化機構の関係については現在、C-PUB1遺伝子破壊株を作製し、検討中である。

Yeast Candida maltosa は protein synthesis resistance against tonic で あ る シ ク ロ ヘ キ シ ミ ド (CYH) に し seaborne て, birth が temporarily stop し た に び after birth が reply す る induced patience を す. こ れ は, CYH, planning to write activity factor C - after adding Gcn4p が, CYH patience L41 リ ボ ソ ー ム (L41 - Q) の survived 伝 protein sequence planning write を induced し, CYH patience リ ボ ソ ー ム が synthetic さ れ る こ と に cause す る. This year, planning to write activity factor C - Gcn4p の を active suppression す る alternate factor C - CPC2 posthumous son 伝 と C - GCN4 mRNA の stability を suppression す る alternate factor C - PUB1 heritage 伝 son の 2 つ の heritage 伝 child obtain を し, salt base with column を decided し た. C - CPC2 heritage 伝 son broken 壊 strains (Δ C - CPC2) を cropping し, wild strains と fertility line speed の is beg を 検 っ た result, CYH not add の wild strains と Δ C - CPC2 の fertility rate は - わ ら な い の に, CYH after adding の Δ C - CPC2 の fertility rate は wild strains と than べ て 遅 く な り を reply, birth の に time Youdaoplaceholder0 する とが clearly ら になった になった. ま た, wild strains と Δ c - cpc2 に お け る CYH after adding の CYH patience L41 リ ボ ソ ー ム survived 伝 protein sequence の 発 now レ ベ ル を compare し た results, Δ c - cpc2 は wild strains よ り も 発 now fewer が な い こ と が Ming ら か と な っ た. す な わ ち, Δ c - の cpc2 cell type CYH patience リ ボ ソ ー ム quantity が wild strains に than べ て less な い た め reply, birth の に time を す る と exam え ら れ た. ま た, Δ c - cpc2 に お け る c - GCN4 mRNA レ ベ ル は wild strains と compare し て ほ と ん ど - わ ら な い こ と か ら, c - Cpc2p は L41 - Q mRNA と c - Gcn4p と の combination, or い は c - Gcn4p の planning write activity の adjustment line を う adjustment factor で あ る こ と が in stopping さ れ た. ま た, C - GCN4 mRNA の stability を suppression す る alternate factor C - Pub1p と CYH patience of induced institution の masato is に つ い て は now, C - PUB1 heritage 伝 し, broken 壊 strains を son beg in 検 で あ る.