酵母における蛋白質合成阻害ストレスに対するmRNA安定化制御機構の研究

酵母响应蛋白质合成抑制应激的mRNA稳定控制机制研究

• 批准号: 16780064
• 负责人: 高久 洋暁
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nigata University of Phermacy and Applied Life Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16780064/
• 关键词: Candida maltosa; C-GCN4; C-GCN2; C-CPC2; C-PUB1; シクロヘキシミド; アミノ酸合成普遍制御; リボソーム蛋白質L41; アミノ酸飢餓の普遍的制御; シクロヘキシミド誘導的耐性化機構; uORF

酵母Candida maltosaは蛋白質合成阻害剤であるシクロヘキシミド(CYH)に対して、生育が一時停止した後に再び生育が回復する誘導的耐性を示す。これは、CYH添加後、転写活性化因子C-Gcn4pが、CYH耐性L41リボソーム蛋白質遺伝子(L41-Q)の転写を誘導し、CYH耐性型リボソームが合成されることに起因する。本年度、転写活性化因子C-Gcn4pの活性を制御する候補因子C-CPC2遺伝子とC-GCN4 mRNAの安定性を制御する候補因子C-PUB1遺伝子の2つの遺伝子を取得し、塩基配列を決定した。C-CPC2遺伝子破壊株(Δc-cpc2)を作製し、野生株と生育速度の比較検討を行った結果、CYH非添加時の野生株とΔc-cpc2の生育速度は変わらないのに、CYH添加後のΔc-cpc2の生育速度は野生株と比べて遅くなり、生育の回復に時間を要することが明らかになった。また、野生株とΔc-cpc2におけるCYH添加後のCYH耐性L41リボソーム蛋白質遺伝子の発現レベルを比較した結果、Δc-cpc2は野生株よりも発現量が少ないことが明らかとなった。すなわち、Δc-cpc2細胞内のCYH耐性型リボソーム量が野生株に比べて少ないため、生育の回復に時間を要すると考えられた。また、Δc-cpc2におけるC-GCN4 mRNAレベルは野生株と比較してほとんど変わらないことから、C-Cpc2pはL41-Q mRNAとC-Gcn4pとの結合、或いはC-Gcn4pの転写活性の調節を行う調節因子であることが示唆された。また、C-GCN4 mRNAの安定性を制御する候補因子C-Pub1pとCYH誘導的耐性化機構の関係については現在、C-PUB1遺伝子破壊株を作製し、検討中である。

Yeast Candida maltosa is resistant to protein synthesis inhibition, fertility cessation, and fertility recovery. After CYH was added, the activation factor C-Gcn4p and CYH-resistant L41 protein gene (L41-Q) were induced, and the CYH-resistant L41 protein gene was synthesized. This year, the candidate factors for controlling the activity of C-GCN4p, C-CPC2 gene and C-GCN4 mRNA, and the candidate factors for controlling the stability of C-PUB1 gene and C-PUB2 gene were obtained and determined. C-CPC-2 mutant plants (Δc-cpc-2) were treated with CYH, and the growth rate of wild plants and Δ c-cpc-2 was compared with that of wild plants. The growth rate of Δ c-cpc-2 after CYH addition was compared with that of wild plants. The recovery time of growth was different. Compared with wild strain, Δ c-cpc2 showed less CYH tolerance after CYH addition. CYH tolerance in Δ c-cpc2 cells is less than that in wild plants, and the recovery time of fertility is more important. C-GCN4 mRNA binding to L41-Q mRNA and C-GCN4 mRNA binding to C-GCN4 mRNA or C-GCN4 mRNA binding to C-GCN4 mRNA regulatory activity in wild plants. The relationship between C-Pub 1p and CYH-induced tolerance mechanism is discussed in this paper.