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Elucidation of the molecular mechanisms by which pectin interacts with small intestinal cells

阐明果胶与小肠细胞相互作用的分子机制

基本信息

批准号：
22H02285
负责人：
矢部富雄
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

水溶性食物繊維であるペクチンは，陸生植物の細胞壁を構成する必須の成分でもある。そこで，プルーン，アップル，レモン，シュガービート，オレンジ，カキ，ユズといった各種の植物からペクチンをオートクレーブを用いて熱水抽出し，DEAEセルロース陰イオン交換カラムを用いてペクチンを精製した後，主鎖の主成分であるガラクツロン酸を酵素により分解してそれぞれのペクチン側鎖を得た。この側鎖に対してTFAによる酸加水分解を行った後，HPLCにより側鎖構造を構成する糖組成を分析した。その結果，側鎖の分岐点となるラムノースと主要な構成糖であるガラクトース（Gal）およびアラビノース（Ara）のそれぞれの存在比から，Gal/Araを算出したところ，Gal比の高いペクチンとAra比の高いペクチンに分類されることを明らかにした。続いて，小腸上皮細胞が分泌するフィブロネクチンとそれぞれのペクチン側鎖との相互作用解析を行ったところ，結合力の強さとGal/Ara比に基づく構成糖比との相関は見られなかった。一方，側鎖のみではなくペクチン分子全体を用いたフィブロネクチンとの相互作用分析では，いずれのペクチンについても類似した結合力が示されたことから，ペクチン分子中の特定の主鎖構造がフィブロネクチンとの相互作用に関与している可能性が示唆された。そこで，主鎖構造のメトキシ化度（DM）を分析した結果，DMが高いほどペクチンとフィブロネクチンとの結合力が強まり，DMが低くなれば結合力が弱まることを見出した。さらに，メトキシ化されていないガラクツロン酸がカルシウムを抱合することによって，両者の結合力は変わらないものの，フィブロネクチンに対するペクチンの結合量が増加することを見出した。

Water-soluble foods are essential components of terrestrial plant cell walls. The main component of the main lock is decomposed by an enzyme called DEAE. The analysis of sugar composition by HPLC was carried out after acid hydrolysis. As a result, the bifurcation point of the side lock is mainly composed of sugar, Gal, Ara, and existence ratio. Gal/Ara is calculated. Gal/Ara is calculated. In addition, the interaction analysis of small intestinal epithelial cells secreting glucose and glucose, the binding force of Gal/Ara ratio, the ratio of glucose to glucose, and the correlation between Gal/Ara ratio and glucose ratio are discussed. On the one hand, the interaction analysis of the whole molecule of the side lock shows that the binding force of the specific main lock structure in the molecule is related to the interaction of the molecule. The results of DM analysis show that DM has high binding force and DM has low binding force. In addition, the binding force of the two kinds of compounds increased, and the binding capacity of the two kinds of compounds increased.