Elucidation of the molecular mechanisms by which pectin interacts with small intestinal cells

水溶性食物繊維であるペクチンは，陸生植物の細胞壁を構成する必須の成分でもある。そこで，プルーン，アップル，レモン，シュガービート，オレンジ，カキ，ユズといった各種の植物からペクチンをオートクレーブを用いて熱水抽出し，DEAEセルロース陰イオン交換カラムを用いてペクチンを精製した後，主鎖の主成分であるガラクツロン酸を酵素により分解してそれぞれのペクチン側鎖を得た。この側鎖に対してTFAによる酸加水分解を行った後，HPLCにより側鎖構造を構成する糖組成を分析した。その結果，側鎖の分岐点となるラムノースと主要な構成糖であるガラクトース（Gal）およびアラビノース（Ara）のそれぞれの存在比から，Gal/Araを算出したところ，Gal比の高いペクチンとAra比の高いペクチンに分類されることを明らかにした。続いて，小腸上皮細胞が分泌するフィブロネクチンとそれぞれのペクチン側鎖との相互作用解析を行ったところ，結合力の強さとGal/Ara比に基づく構成糖比との相関は見られなかった。一方，側鎖のみではなくペクチン分子全体を用いたフィブロネクチンとの相互作用分析では，いずれのペクチンについても類似した結合力が示されたことから，ペクチン分子中の特定の主鎖構造がフィブロネクチンとの相互作用に関与している可能性が示唆された。そこで，主鎖構造のメトキシ化度（DM）を分析した結果，DMが高いほどペクチンとフィブロネクチンとの結合力が強まり，DMが低くなれば結合力が弱まることを見出した。さらに，メトキシ化されていないガラクツロン酸がカルシウムを抱合することによって，両者の結合力は変わらないものの，フィブロネクチンに対するペクチンの結合量が増加することを見出した。

水溶性食物繊維であるペクチンは，陸生植物の細胞壁を構成する必須の成分でもある。そこで，プルーン，アップル，レモン，シュガービート，オレンジ，カキ，ユズといった各種の植物からペクチンをオートクレーブを用いて熱水抽出し，DEAEセルロース陰イオン交換カラムを用いてペクチンを精製した後，主鎖の主成分であるガラクツロン酸を酵素により分解してそれぞれのペクチン側鎖を得た。この側鎖に対してTFAによる酸加水分解を行った後，HPLCにより側鎖構造を構成する糖組成を分析した。その結果，側鎖の分岐点となるラムノースと主要な構成糖であるガラクトース（Gal）およびアラビノース（Ara）のそれぞれの存在比から，Gal/Araを算出したところ，Gal比の高いペクチンとAra比の高いペクチンに分類されることを明らかにした。続いて，小腸上皮細胞が分泌するフィブロネクチンとそれぞれのペクチン側鎖との相互作用解析を行ったところ，結合力の強さとGal/Ara比に基づく構成糖比との相関は見られなかった。一方，側鎖のみではなくペクチン分子全体を用いたフィブロネクチンとの相互作用分析では，いずれのペクチンについても類似した結合力が示されたことから，ペクチン分子中の特定の主鎖構造がフィブロネクチンとの相互作用に関与している可能性が示唆された。そこで，主鎖構造のメトキシ化度（DM）を分析した結果，DMが高いほどペクチンとフィブロネクチンとの結合力が強まり，DMが低くなれば結合力が弱まることを見出した。さらに，メトキシ化されていないガラクツロン酸がカルシウムを抱合することによって，両者の結合力は変わらないものの，フィブロネクチンに対するペクチンの結合量が増加することを見出した。