Functional analysis of novel proteins that accumulate at interorganelle contact sites

本研究では，我々が独自に開発したオルガネラ間コンタクトサイトに局在するタンパク質を網羅的に同定する方法を用いて新たに見出したオルガネラコンタクトサイト局在タンパク質の機能解明を目的としている。具体的にはヒトER-ミトコンドリア間や，出芽酵母の核膜-液胞間，ミトコンドリア-液胞間コンタクトサイトに局在することが示唆されている新規因子の機能を解明する。特に昨年度は核膜-液胞間コンタクトサイト（NVJ, Nuclear-Vacuole Junction）に局在することが示唆されていたタンパク質の内，4つの因子が新規NVJ因子であることを確認し，Gdn1, 2, 3, 4と命名した。NVJ形成コア因子であるNvj1, Vac8を欠失した細胞ではGdn1はNVJに集積できなくなっていたことから，Gdn1がNVJのコアサブユニットに依存してNVJに集積することがわかった。また興味深いことに，Gdn1, 2, 3, 4はグルコース飢餓依存的にNVJに集積する因子であることがわかった。さらにGdn1に関して研究を進めたところ，Gdn1が欠損した酵母株ではGdn2, 3, 4がNVJ局在に局在できなくなることがわかった。この結果から，Gdn1がGdn2, 3, 4のNVJ局在化に関与する上流因子であることがわかった。さらに研究をすすめることで，グルコース濃度依存的にNVJが拡大するメカニズムの解明に貢献する研究成果が得られると期待される。ヒトミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトに関しては，同定していた多くの候補因子100種類程度を全てクローニング氏，細胞内で過剰発現させ，ミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトの形成に影響する因子を探索した。しかしながら，ミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトの形成に顕著に影響する因子を同定することはできなかった。

本研究では，我々が独自に開発したオルガネラ間コンタクトサイトに局在するタンパク質を網羅的に同定する方法を用いて新たに見出したオルガネラコンタクトサイト局在タンパク質の機能解明を目的としている。具体的にはヒトER-ミトコンドリア間や，出芽酵母の核膜-液胞間，ミトコンドリア-液胞間コンタクトサイトに局在することが示唆されている新規因子の機能を解明する。特に昨年度は核膜-液胞間コンタクトサイト（NVJ, Nuclear-Vacuole Junction）に局在することが示唆されていたタンパク質の内，4つの因子が新規NVJ因子であることを確認し，Gdn1, 2, 3, 4と命名した。NVJ形成コア因子であるNvj1, Vac8を欠失した細胞ではGdn1はNVJに集積できなくなっていたことから，Gdn1がNVJのコアサブユニットに依存してNVJに集積することがわかった。また興味深いことに，Gdn1, 2, 3, 4はグルコース飢餓依存的にNVJに集積する因子であることがわかった。さらにGdn1に関して研究を進めたところ，Gdn1が欠損した酵母株ではGdn2, 3, 4がNVJ局在に局在できなくなることがわかった。この結果から，Gdn1がGdn2, 3, 4のNVJ局在化に関与する上流因子であることがわかった。さらに研究をすすめることで，グルコース濃度依存的にNVJが拡大するメカニズムの解明に貢献する研究成果が得られると期待される。ヒトミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトに関しては，同定していた多くの候補因子100種類程度を全てクローニング氏，細胞内で過剰発現させ，ミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトの形成に影響する因子を探索した。しかしながら，ミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトの形成に顕著に影響する因子を同定することはできなかった。