蛋白質のミトコンドリア膜透過におけるTim23-Tim50相互作用の役割の解析

Tim23-Tim50相互作用在蛋白质线粒体膜渗透中的作用分析

• 批准号: 04J05940
• 负责人: 田村 康
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J05940/
• 关键词: ミトコンドリア; 酵母; トランスロケータ; 膜透過; 蛋白質輸送; 出芽酵母; トランスロケーター; Tim23; Tim50

ミトコンドリア内膜膜透過装置TIM23複合体の構成因子である、Tim23、Tim50は、膜間部にドメインを持ち、互いに相互作用する事で膜透過反応を促進していると考えられている。本研究ではTim23-Tim50相互作用が弱くなるtim23またはtim50変異体を多数単離し、解析した。Tim23-Tim50相互作用はTIM23複合体が外膜との近接に寄与し、TOM40複合体からのタンパク質の受け渡しの効率を上げている事が示された。またこれらのミトコンドリアでは、TIM23複合体を介して膜間部へ移行する基質のインポートよりも、TIM23複合体を介してマトリクスへ移行する基質のインポートに顕著な阻害を示した。この事により、膜間部でのTim23-Tim50相互作用が、マトリクスに局在するモータータンパク質の作業機構に何らかの影響を与えている事が示された。さらに、TIM23複合体経路のタンパク質輸送に関与する新規因子を探索し、Tam41を同定した。Tam41は酵母からヒトまでの幅広い生物種間で保存された、マトリクス側にドメインを持つ内膜表在性タンパク質であった。Tam41とTIM23複合体構成因子との直接的な相互作用は検出されなかったが、Tam41を欠損したミトコンドリアでは、TIM23複合体組み込まれるモータータンパク質の量が著しく減少した。さらに、Blue-Native PAGEを用いた解析により、Tam41を欠損したミトコンドリアでは、モータータンパク質を含まないTIM23コア複合体の見かけの分子量が減少する事が明らかとなった。これらの結果から、Tam41はTIM23複合体のアセンブリーを維持するために重要である事が示された。またこのTIM23複合体のアセンブリー維持が、TIM23複合体の一部であるモータータンパク質群のTIM23コア複合体への会合に重要である事が明らかとなった。

ミ ト コ ン ド リ ア lining composite membrane through device TIM23 の constitute factor で あ る, TIM23, Tim50 は, membrane between に ド メ イ ン を hold ち, mutual い に interaction す る matter で membrane through the 応 を promote し て い る と exam え ら れ て い る. In this study, the で で tim23-tim50 interaction が is weak くなるtim23また また tim50 variants を are mostly 単 isolated from <s:1>, and the analysis of た た. Tim23 - Tim50 interaction は Tim23 complex が outer membrane と の nearly に send with し, TOM40 complex か ら の タ ン パ ク qualitative の by crossing け し の sharper rate on を げ て い が る things in さ れ た. ま た こ れ ら の ミ ト コ ン ド リ ア で は, TIM23 complex を dielectric し て membrane department へ transitions between す る matrix の イ ン ポ ー ト よ り も, TIM23 complex を dielectric し て マ ト リ ク ス へ transitional す る matrix の イ ン ポ ー ト に 顕 the な resistance against を shown し た. こ の matter に よ り, membrane between で の Tim23 - Tim50 が interaction, マ ト リ ク ス に bureau in す る モ ー タ ー タ ン パ ク qualitative の what job agencies に ら か の influence を and え て い が る things in さ れ た. Youdaoplaceholder0, TIM23 complex pathway タ, パ パ, に relationship and する new regulation factor を exploration of <s:1>, Tam41を and <s:1> た. Tam41 は yeast か ら ヒ ト ま で の picture hiroo い biological species で save さ れ た, マ ト リ ク ス side に ド メ イ ン を hold つ lining table in the sexual タ ン パ ク qualitative で あ っ た. Tam41 と TIM23 complex form factor と の interact directly な は 検 out さ れ な か っ た が, Tam41 を owe loss し た ミ ト コ ン ド リ ア で は, TIM23 complex み 込 ま れ る モ ー タ ー タ ン パ ク quality の quantity が the し く reduce し た. さ ら に, Blue - Native PAGE を with い た parsing に よ り, Tam41 を owe loss し た ミ ト コ ン ド リ ア で は, モ ー タ ー タ ン パ ク qualitative を containing ま な い TIM23 コ ア complex の see か け の が molecular weight reducing す る matter が Ming ら か と な っ た. こ れ ら の results か ら, Tam41 は TIM23 complex の ア セ ン ブ リ ー を maintain す る た め に important で あ が る things in さ れ た. ま た こ の TIM23 complex の ア セ ン ブ リ ー maintain が, TIM23 complex の a で あ る モ ー タ ー タ ン パ ク mass group の TIM23 コ ア complex へ meet の に important で あ る matter が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Identification of Tam4l maintaining integrity of the TIM23 protein translocator complex in mitochondria

Tam4l 的鉴定维持线粒体中 TIM23 蛋白易位复合物的完整性

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Cell Biol. 174
• 作者: Y.Tamura;Y.Harada;K.Yamano;K.Watanabe;D.Ishikawa;C.Ohshima;S.Nishikawa;H.Yamamoto;T.Endo
• 通讯作者: T.Endo

Two novel proteins in the mitochondrial outer membrane mediate b-barrel protein assembly

线粒体外膜中的两种新蛋白介导 b 桶蛋白组装

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Cell Biology 166
• 作者: Ishikawa;D.;Yamamoto;H.;Tamura;Y.;Moritoh;K.;Endo;T.
• 通讯作者: T.

Identification of a novel member of yeast mitochondrial Hsp70-associated motor and chaperone proteins that facilitates protein translocation across the inner membrane

• DOI: 10.1016/j.febslet.2004.12.018
• 发表时间: 2005-01-17
• 期刊: FEBS LETTERS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Yamamoto, H;Momose, T;Endo, T
• 通讯作者: Endo, T