マラリア慢性感染における記憶CD4+T細胞のIL-27による制御とその解除

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１)IL-27中和マウス内PbT-II細胞のフローサイトメトリー解析マラリア原虫特異的T細胞受容体トランスジェニックマウスPbT-IIのCD4+T細胞をC57BL/6マウスに受身移入し、マラリア原虫Plasmodium chabaudiの感染実験を行った。抗体によりIL-27を中和する群と、IgGコントロール抗体投与群を比較し,感染後、脾臓PbT-II細胞のフローサイトメトリー解析を行った。感染７日目、中和群とコントロール間に顕著な差は認めなかったが、14日目以降中和群ではCD127+KLRG1-細胞とCD127-KLRG1+細胞の比率が高く、またCXCR6+Tbet+のTh1型の細胞の比率が顕著に高くなった。一方コントロール群はCD127-KLRG1-かつTbet-TCF1+が多数であった。マラリア原虫感染初期の限定的IL-27中和により、成熟分化する原虫抗原特異的CD4+T細胞がTh1型優位になることが明らかになった。B)シングルセル遺伝子発現解析同上の実験モデルマウスからPbT-II細胞をソーティングにより分離精製し、シングルセルRNAseqライブラリーを作成して次世代シーケンサーにより遺伝子発現解析を行った。クラスタリング解析等により、感染７日目のPbT-II細胞はTh1型、Tfh型、記憶前駆細胞型の遺伝子発現をする細胞がほぼ三分の一づつを占めること、IL-27中和群とコントロール群の間には細胞数比率に多少の違いはあるものの、質的には大差ないことが明らかになった。一方、感染２８日目のIL-27中和群のCD127+KLRG1-細胞とCD127-KLRG1+細胞は、共にTh1様の遺伝子発現を示すが、発現する遺伝子のパターンは大きく異なっていた。IL-27を感染初期に中和すると、ユニークなTh1型の原虫抗原特異的CD4+T細胞が分化し維持されることが明らかになった。