Molecular mechanisms that maintain stemness in metastatic colorectal cancer

维持转移性结直肠癌干性的分子机制

• 批准号: 22H02909
• 负责人: 青木 正博
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02909/
• 关键词: 大腸がん; 転移; がん幹細胞; マウスモデル

大腸がんに関連する4つの遺伝子（Ctnnb1、Kras、Trp53、 Smad4）の変異を腸管上皮細胞に散発的に導入することによって、腺がんを自然発症して肝臓に転移する、新規転移性大腸がんマウスモデル（CKPSマウス）の作出に成功している。そしてCKPSマウスの解析からcAMP/PKA/CREB-ALCAM経路、およびシグナル経路Xの活性化が大腸がんのがん幹細胞性の維持に関与し、転移形成能を正に制御することを見出している。これらの予備的検討結果に立脚し、令和4年度は以下の研究を実施した。1. PKA-CREB-ALCAM経路の役割解明: CREBが制御する、大腸がん幹細胞性に関与する遺伝子を同定するため、リン酸化CREB抗体を用いたChIP-seq解析を実施した。CKPSマウス由来の大腸がん細胞株(CKPS細胞)を、通常（2次元）培養条件とがん幹細胞（3次元）培養条件で培養した後、リン酸化CREB抗体を用いたChIP-seq解析を実施したところ、がん幹細胞培養で増加する配列を約450個、減少する配列を約250個同定することができた。これらの近傍遺伝子リストから、がん幹細胞性およびALCAMの発現調節に関与する遺伝子の候補を絞り込む作業を行っている。2. シグナル経路Xの役割解明: シグナル経路Xの下流で転移性大腸がんの幹細胞性・転移形成能に関与する分子を同定するため、経路Xの重要な構成因子をコードする遺伝子3つをそれぞれノックアウト（KO）したCKPS細胞、および対照CKPS細胞を用いた脾注肝転移モデルにより肝転移巣を形成させ、それぞれの転移巣組織を回収し、RNA-seq解析を実施した。これまでに、構成因子AをKOした細胞の肝転移巣において分泌に関わる遺伝子などの発現が上昇していることを確認している。現在これらの発現制御機構や転移における役割について解析を行っている。

E. が ん に masato even す る 4 つ の heritage 伝 child (Ctnnb1, Kras, Trp53 and Smad4) の - different を insufflate epithelial cells of scattered 発 に に import す る こ と に よ っ て, glandular が ん を natural 発 disease し て routine liver に planning move す る, new rules planning moves e. が ん マ ウ ス モ デ ル (CKPS マ ウ ス) の make に successful し て い る. そ し て CKPS マ ウ ス の parsing か ら cAMP/PKA/after CREB - ALCAM 経 road, お よ び シ グ ナ ル 経 の way X activeness が e. が ん の が sex の ん stem cells maintain に masato with し, planning to move to form can を is に suppression す る こ と を shows し て い る. The 検 research results に prepared by に れら are based on the research and を practical implementation た of the れら research in the fourth year of Reiwa and below. 1 PKA - after CREB - ALCAM 経 road cut interpret の service: after CREB が suppression す る, e. が ん stem cell sex に masato and す る posthumous son 伝 を with fixed す る た め, リ ン を acidification after CREB antibody with い た ChIP - seq parsing を be applied し た. CKPS マ ウ ス origin の e. が ん cell lines (CKPS cells) を, (2) the conditions usually と が ん stem cells (three dimensional) cultivation conditions で し た, リ ン を acidification after CREB antibody with い た ChIP - seq parsing を be applied し た と こ ろ, が ん stem-cell cultures で raised す requirement by about 450, reducing す る match column を る column Youdaoplaceholder0 about 250 congruents する とがで とがで た た. こ れ ら の nearly alongside posthumous son 伝 リ ス ト か ら, が ん stem cell sex お よ び ALCAM の 発 now adjust に masato and す る posthumous son 伝 の alternate を ground り 込 む line homework を っ て い る. 2. Youdaoplaceholder0: シ グ ナ ル X の obscene で 経 road planning moves e. が ん の stem cell sex, planning can move form に masato and す を る molecules with fixed す る た め, 経 の な constitute important factor X を コ ー ド す る heritage 伝 child 3 つ を そ れ ぞ れ ノ ッ ク ア ウ ト (KO) し た CKPS cells, お よ び polices according to CKPS cells を using い た spleen liver injection planning move モ デ ル に よ り liver planning 巣 Youdaoplaceholder0 forms させ, それぞれ <s:1> 転 migratory tissues を reproduces させ, RNA-seq analysis を implements た. こ れ ま で に, constitute factor A を KO し た の liver cells move planning 巣 に お い て secretion に masato わ る posthumous son 伝 な ど の 発 now rising が し て い る こ と を confirm し て い る. Now, <s:1> れら the development control agency や転 is transferred to における to cut に に て て て analysis を line って る る る.

项目成果

大腸がんの幹細胞性と転移能に重要な腫瘍微小環境関連シグナル経路の解明

阐明对结直肠癌干性和转移潜力重要的肿瘤微环境相关信号通路

• 发表时间: 2022
• 作者: 青木正博;武藤誠;藤下晃章
• 通讯作者: 藤下晃章

The cAMP/PKA/CREB and TGFβ/SMAD4 Pathways Regulate Stemness and Metastatic Potential in Colorectal Cancer Cells

• DOI: 10.1158/0008-5472.can-22-1369
• 发表时间: 2022-11-15
• 期刊: CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.2
• 作者: Fujishita, Teruaki;Kojima, Yasushi;Aoki, Masahiro
• 通讯作者: Aoki, Masahiro

Involvement of clusterin expression in the refractory response of pancreatic cancer cells to a MEK inhibitor.

• DOI: 10.1111/cas.15735
• 发表时间: 2023-05
• 期刊: Cancer science
• 影响因子: 5.7

The landscape of systemic metabolic alterations in cancer cachexia.

癌症恶病质的全身代谢改变。

• 发表时间: 2022
• 作者: 碇 直樹;中村 康之;荒川 博文;熱田雄也，遠矢 嵩，貞任大地，平間千津子，近藤花織，貞賀泰孝，加藤千賀，酒井知史，神原康弘，小沼亮介，島袋将志，厚井聡志，神宮司淳史，細田 譲，尾内大志，濱村貴史，新谷直樹，清水啓明，名島悠峰，小林 武，原田浩徳，原田結花，土岐典子;高橋暁子;Masahiro Aoki
• 通讯作者: Masahiro Aoki

マウスモデルを用いた大腸がんの幹細胞性・転移形成能に関与するシグナル経路の解析

利用小鼠模型分析结直肠癌干性和转移形成能力涉及的信号通路

• 发表时间: 2022
• 作者: 青木正博;武藤誠;藤下晃章
• 通讯作者: 藤下晃章