Comprehensive search for host factors related to liver fibrosis mechanisms and development of novel therapeutic strategies

本研究は，従来非可逆的とされていた肝硬変症の組織病態を積極的に修復する手法を開発するために，肝硬変の組織病態の修復機構を解析し、肝星細胞を標的とした細胞・薬物療法による肝線維化の組織修復を促進する治療法の効果、作用機構等を解析することを目的として遂行し、以下の成果を得た。1. 血清組織糖鎖修飾構造の網羅的探索： ●NAFLDの線維化の進展に伴い患者血清中のA2F bisect 糖鎖の発現が疾患特異的に上昇することを示した。2. 培養星細胞をもちいた肝線維化・修復に関連する成分分析：● A2F bisect糖鎖のキャリア蛋白としてIgAをはじめとする複数の蛋白を同定した。●活性化培養ヒト肝星細胞の細胞および培養上清の包括的糖鎖分析により、2種のN-結合型フコース含有糖鎖が著明上昇することを見いだし、それらのキャリア蛋白として既知のM2BPに加え、フィブロネクチンをはじめとする複数の蛋白を同定した。●同定された糖鎖修飾構造、キャリア蛋白の修飾の線維化進展に与える影響を解析する。また、糖鎖修飾構造に対する特異抗体を用いた星細胞活性化抑制効果についても解析を進める。● 培養肝星細胞活性化に関連するmicro RNAの包括的解析を施行し、miR-29a、miR-449a、その他特定のmiRNAが活性化星細胞で高発現し、knock downにより星細胞alpha-SMA、type-I collagen発現が抑制されることを示した。Pathway解析では、これらのmiRNAは細胞骨格、細胞外マトリックス、chemotaxis関連経路の蛋白の発現を調節していることが明らかとなった。● C型肝炎SVR後発癌症例では血清中のAng2が有意に高値であり、治療標的としての可能性が示された。

本研究は，従来非可逆的とされていた肝硬変症の組織病態を積極的に修復する手法を開発するために，肝硬変の組織病態の修復機構を解析し、肝星細胞を標的とした細胞・薬物療法による肝線維化の組織修復を促進する治療法の効果、作用機構等を解析することを目的として遂行し、以下の成果を得た。1. 血清組織糖鎖修飾構造の網羅的探索： ●NAFLDの線維化の進展に伴い患者血清中のA2F bisect 糖鎖の発現が疾患特異的に上昇することを示した。2. 培養星細胞をもちいた肝線維化・修復に関連する成分分析：● A2F bisect糖鎖のキャリア蛋白としてIgAをはじめとする複数の蛋白を同定した。●活性化培養ヒト肝星細胞の細胞および培養上清の包括的糖鎖分析により、2種のN-結合型フコース含有糖鎖が著明上昇することを見いだし、それらのキャリア蛋白として既知のM2BPに加え、フィブロネクチンをはじめとする複数の蛋白を同定した。●同定された糖鎖修飾構造、キャリア蛋白の修飾の線維化進展に与える影響を解析する。また、糖鎖修飾構造に対する特異抗体を用いた星細胞活性化抑制効果についても解析を進める。● 培養肝星細胞活性化に関連するmicro RNAの包括的解析を施行し、miR-29a、miR-449a、その他特定のmiRNAが活性化星細胞で高発現し、knock downにより星細胞alpha-SMA、type-I collagen発現が抑制されることを示した。Pathway解析では、これらのmiRNAは細胞骨格、細胞外マトリックス、chemotaxis関連経路の蛋白の発現を調節していることが明らかとなった。● C型肝炎SVR後発癌症例では血清中のAng2が有意に高値であり、治療標的としての可能性が示された。