Comprehensive search for host factors related to liver fibrosis mechanisms and development of novel therapeutic strategies

全面寻找肝纤维化机制相关宿主因素并开发新的治疗策略

• 批准号: 22H03050
• 负责人: 坂本 直哉
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03050/
• 关键词: 肝線維化

本研究は，従来非可逆的とされていた肝硬変症の組織病態を積極的に修復する手法を開発するために，肝硬変の組織病態の修復機構を解析し、肝星細胞を標的とした細胞・薬物療法による肝線維化の組織修復を促進する治療法の効果、作用機構等を解析することを目的として遂行し、以下の成果を得た。1. 血清組織糖鎖修飾構造の網羅的探索： ●NAFLDの線維化の進展に伴い患者血清中のA2F bisect 糖鎖の発現が疾患特異的に上昇することを示した。2. 培養星細胞をもちいた肝線維化・修復に関連する成分分析：● A2F bisect糖鎖のキャリア蛋白としてIgAをはじめとする複数の蛋白を同定した。●活性化培養ヒト肝星細胞の細胞および培養上清の包括的糖鎖分析により、2種のN-結合型フコース含有糖鎖が著明上昇することを見いだし、それらのキャリア蛋白として既知のM2BPに加え、フィブロネクチンをはじめとする複数の蛋白を同定した。●同定された糖鎖修飾構造、キャリア蛋白の修飾の線維化進展に与える影響を解析する。また、糖鎖修飾構造に対する特異抗体を用いた星細胞活性化抑制効果についても解析を進める。● 培養肝星細胞活性化に関連するmicro RNAの包括的解析を施行し、miR-29a、miR-449a、その他特定のmiRNAが活性化星細胞で高発現し、knock downにより星細胞alpha-SMA、type-I collagen発現が抑制されることを示した。Pathway解析では、これらのmiRNAは細胞骨格、細胞外マトリックス、chemotaxis関連経路の蛋白の発現を調節していることが明らかとなった。● C型肝炎SVR後発癌症例では血清中のAng2が有意に高値であり、治療標的としての可能性が示された。

This study aims to develop methods for active repair of liver cirrhosis, analyze the mechanisms for repair of liver cirrhosis, target hepatic stellate cells, and analyze the effects and mechanisms of treatment for tissue repair of liver cirrhosis. 1. Exploration of the structure of serum tissue glycopolock modification: ● The development of NAFLD linear maintenance is accompanied by the development of A2F bisect glycopolock in patient serum, which is shown to be disease-specific. 2. Analysis of the components related to liver maintenance and repair in cultured astrocytes: A2F bisect, IgA, and multiple proteins Glycolock analysis of activated cultured hepatic stellate cells and culture supernatants, including two types of N-binding proteins, revealed that they were elevated, and that they were stable in the presence of known M2BP and M2 protein.● Analysis of the effects of the same sugar lock modification structure, protein modification and linear dimensional progress. The use of specific antibodies to inhibit the activation of astrocytes by sugar lock modification Analysis of micro RNAs including miR-29a, miR-449a, and other specific miRNAs associated with activation of cultured hepatic stellate cells showed high expression, knock down, inhibition of stellate alpha-SMA, and type-I collagen expression. Pathway analysis: miRNA regulates the expression of proteins associated with cellular, extracellular, and chemotaxis pathways.● Hepatitis C SVR after cancer cases, serum Ang2 is intentionally high, treatment target and the possibility of change is shown.

项目成果

Simultaneous determination of heparan sulfate, chondroitin/dermatan sulfates, and hyaluronan glycosaminoglycan disaccharides by high-performance liquid chromatography using a reverse-phase column with adamantyl groups

使用金刚烷基反相柱通过高效液相色谱同时测定硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素/硫酸皮肤素和透明质酸糖胺聚糖二糖

• DOI: 10.1016/j.chroma.2022.463748
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Chromatography A
• 影响因子: 4.1
• 作者: Hanamatsu Hisatoshi;Makino Satoshi;Ohara Masatsugu;Suda Goki;Yokota Ikuko;Nishihara Shoko;Sakamoto Naoya;Furukawa Jun-ichi
• 通讯作者: Furukawa Jun-ichi

The potential of soluble CD14 in discriminating nonalcoholic steatohepatitis from nonalcoholic fatty liver disease

• DOI: 10.1111/hepr.13757
• 发表时间: 2022-02-22
• 期刊: HEPATOLOGY RESEARCH
• 影响因子: 4.2
• 作者: Nakamura, Akihisa;Yamamoto, Koji;Sakamoto, Naoya
• 通讯作者: Sakamoto, Naoya