Elucidating the transcriptional network for profibrotic secretome and its application for heart failure therapy

阐明促纤维化分泌蛋白组的转录网络及其在心力衰竭治疗中的应用

• 批准号: 22H03071
• 负责人: 星野 温
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03071/
• 关键词: 線維化; セクレトーム; スクリーニング

NRF2の線維化関連遺伝子発現調節機構の解明のため、NRF2転写複合体の解析をBioID（近位依存性ビオチン標識）にて行った。BioIDはNRF2-TurboIDノックイン細胞、Smad4-TurboIDノックイン細胞をそれぞれCRISPRによるゲノム編集にて作成し生理的タンパク質発現レベルでのタンパク質複合体評価を実施した。その結果、corepressorとして知られるDDX54がNRF2の線維化関連遺伝子発現抑制に関与していることが示唆された。マウスモデルでの評価は、Keap1-floxマウスをPostn-MerCreMerマウスと掛け合わせた薬剤誘導性・線維芽細胞特異的Keaplノックアウトマウスを用いて、圧負荷心不全モデルにおいて心臓線維化の評価を行った。８週齢マウスにタモキシフェンを腹腔内投与し、９週齢で横行大動脈縮窄術を施行し１３週齢で評価を行った。Keap1ノックアウトで有意な線維化抑制を確認するとともに心肥大の抑制も確認できた。また腎臓の線維化に関しても片側尿細管結紮モデルで評価したところ、こちらも間質線維化の抑制を確認できた。中分子ペプチドに関しては10mM程度の高容量ではNRF2活性化作用が確認できたが、細胞内への移行が簡単ではなくTATペプチドを結合したり、脂質粒子での細胞内取り込みを向上を施したが低用量での活性化が難しいため低分子化合物での評価を進める方針とした。

The NRF2 system maintains that the local authority interprets the data, and the NRF2 writes a copy to parse the BioID (proximity dependence identity). BioID

项目成果

Keap1-NRF2 pathway attenuates fibroblast activation and cardiac fibrosis

Keap1-NRF2 通路减弱成纤维细胞活化和心脏纤维化

• 发表时间: 2022
• 作者: 小山壱也;三橋惇志;今倉健;村上行人;香川耕造;佐藤正大;河野弘;小川博久;西岡安彦;西地稔幸
• 通讯作者: 西地稔幸