尿路上皮癌モデルを用いた細胞アトラス構築を基盤とした免疫相関機序の解明と臨床応用

基于尿路上皮癌模型细胞图谱构建阐明免疫相关机制及临床应用

• 批准号: 22H03210
• 负责人: 西山 博之
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2027-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03210/
• 关键词: 尿路上皮癌; 膀胱癌; がん免疫微小環境

膀胱発癌過程において細胞アトラスが時間的にどのように変化するのかを明らかにするために、まずマウスBBN膀胱発癌モデルおよび膀胱癌細胞株皮下接種モデルを用いて経時的な腫瘍浸潤リンパ球（TIL）のプロファイリングを行った。BBNの投与開始前（0週）、4、8、12週後に膀胱を摘出し、FACSによりCD45+リンパ球を分離し、さらにCD4+およびCD8+の発現によってT細胞のフェノタイピングを行った。0週ではリンパ球が僅かであったが、4-12週にかけて著明に増加し、CD4+T細胞でも同様であった。一方、CD8+T細胞は経時的に増加傾向を認めたが、細胞数は12週時点でも全細胞の0.04%と僅かであった。以上より、今後のTIL解析は病理学的な発癌が始まる8週以降での実施が適切であると考えられた。一方、皮下接種モデルでは7日目以降十分な数のリンパ球を分離できた。1か月まで経時的に解析した結果、リンパ球、CD8+T細胞とともに14日目までは増加傾向を示したが、以降は頭打ちとなった。この理由として、腫瘍壊死との関連が示唆された。さらにTAMやMDSCも解析したが同様の経時的な変化を認めた。以上より、皮下接種モデルでは14日前以降は腫瘍壊死の影響が表れるため、7-14日程度でのTIL解析が適切であると考えられた。次に、マウス膀胱発癌モデルにおけるiMscopeを用いたホスファチジン酸（PA）のターゲット解析を通して脂質構成プロファイリングを試みた。0-20週にかけて総PA量は経時的に増加し、正常粘膜と異形成粘膜や非浸潤癌と浸潤癌ではPA分子種のプロファイルが異なることが明らかとなった。以上より、PAのターゲット分析を通して、iMscopeを用いた膀胱発癌モデルにおける脂質構成プロファイリングが実施可能であることが明らかとなった。

The process of bladder cancer is the same as the cells and the time of bladder cancer.化するのかを明らかにするために、まずマウスBBN bladder disease Tumor-infiltrating tuberculosis (TIL) was performed when the bladder cancer cell line was inoculated subcutaneously with the tuberculosis tube. Before the start of BBN administration (week 0), after 4, 8, and 12 weeks, bladder removal, FACS, CD45+パspherical isolation し, さらにCD4+およびCD8+の発开によってT cells のフェノタイピングを行った. 0 weeks of ではリンパがonly かであったが, 4-12 weeks of にかけて明に姗add, CD4+T cell でも同様であった. On the one hand, the increase tendency of CD8+ T cells at 12 weeks was found to be 0.04% of the total cells, and the number of cells was only 0.04% at 12 weeks. From the above, the pathological diagnosis of TIL analysis and pathological diagnosis of cancer should be performed after 8 weeks and the appropriate treatment will be given. On the one hand, subcutaneously inoculate モデルでは for 7 days and then reduce the number of なリンパをseparated できた. The results of the analysis at the time of January 1st, リンパball, CD8+T cell increased tendency on the 14th day of the month showed the trend of the increase, and the results of the decrease of the first day of the day. The reason is the reason, the swelling and death are related to the reason, and the reason is the connection.さらにTAMやMDSCもANALYSISしたが同様の経 な変化を知めた. The above table shows the effects of subcutaneous inoculation of the drug on reducing swelling, infection and death from 14 days ago, and the level of TIL analysis from 7 to 14 days is appropriate.に、マウス bladder cancer モデルにおけるiMscopeを use いたホスファチジPA acid (PA) analysis and lipid composition analysis and analysis. From 0 to 20 weeks, the amount of PA should be increased and normal mucosa and abnormal mucosa should not be soaked. The molecular species of invasive cancer and invasive cancer is the same as that of the PA molecular species. Above, the analysis of PA and PA and the use of iMscope for bladder cancerデルにおける Lipid composition プロファイリングが実丝possible であることが明らかとなった.