平滑筋ミオシン軽鎖リン酸化酵素のアクチン結合と収縮制御

平滑肌肌球蛋白轻链激酶的肌动蛋白结合和收缩控制

• 批准号: 03268201
• 负责人: 桑山 秀人
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03268201/
• 关键词: 平滑筋; ミオシン軽鎖リン酸化酵素; アクトミオシン; ライオトニン; カルシウム

平滑筋のアクチンとミオシンの反応を活性化するCaの作用についてはミオシンフィラメント側であるというミオシンのリン酸化説とアクチンフィラメント側であるというライオトニン(Ln)があり未解決の問題になっている。Ln説における研究課題の一つはアクチンフィラメント側からの制御とは具体的にどのような機構なのかを示す事である。本研究では平滑筋リン酸化酵素(MLCK)の特質の一つであるアクチンとの相互作用に焦点を絞りそれが制御にどのような役割をもつかについて明かにすることを目的とする。トリ筋胃MLCKを抗原にして作成した単クロ-ン抗体はウシ平滑筋のMLCK(155kDa)とも反応しごくわずかであるが155kDa成分による平滑筋アクトミオシン活性化を阻害する。そこでアクチンフィラメント側からの活性化を説明する上で重要と考え155kDa成分における抗体のエピト-プを決定することを試みた。155kDa成分をサ-モライシンにより限定加水分解するとまず130kDaさらに120kDa以下の小さなフラグメントができた。抗体と反応する10kDa以上の高分子量成分としては130kDaのみが認められた。キモトリプシンによる限定分解ではサ-モライシンと同様の反応のほかに抗体と反応する35kDa成分と反応しない120kDa成分への分断反応も生じた。35kDa成分はすぐ分解消失し120kDa成分はさらに100kDa成分に分解した。またトリプシン分解では分子量約60kDaの成分が残った。キモトリプシン断片100kDa成分についてN端側をシ-ケンサ-で分析しすでに決定済みの155kD配列と比較検討したところC末端まで904残基の分子量100423とよく合うので断片100kDa成分は155kDaのC末端まで含んでいると示唆される。35kDa成分について安定な調整法を確立しアクチンと結合するかどうかを調べたい。

Smooth ribs and activated ribs The role of the についてはムシンのリン acidification story とアクチンフィラメントlateral であるというライオトニン(Ln)がありUnsolved problemになっている. Ln talks about the research topic of the research projectの一つはアクチンフィラメントlateralらのcontrol and とはspecific にどのようなorganization and なのかをshows す事である. This study explores the specific characteristics of MLCK (MLCK) and its interactions. Focus を twisting りそれがcontrol にどのような佒もつかについて明かにすることをpurpose とする. Torokin stomach MLCK antigen にして made した単クロ-ンantibody はウシ smooth muscle MLCK (155kDa) It is a 155kDa ingredient that is used to smooth the muscles of the skin and activate it.そこでアクチンフィラメントlateral からのActivationをExplanationする上でimportantとtestえ155kDa ingredient におけるantibodyのエピト-プをdeterminationすることをtestみた. 155kDa ingredient をサ-モライシンによりlimited hydrolysis するとまず 130kDa さらに 120kDa or less の小さなフラグメントができた. The antibody is a high molecular weight component that reacts with 10kDa or more and is a 130kDa high molecular weight component.キモトリプシンによるlimited decompositionではサ-モライシンと同様のanti応のほかにantibodyとAnti-anti-する35kDa ingredients and anti-anti-しない120kDa ingredients are divided anti-anti-すも生じた. The 35kDa component is decomposed and disappears. The 120kDa component is decomposed and the 100kDa component is decomposed. The decomposition of the Torotron is a component with a molecular weight of about 60kDa.キモトリプシン fragment 100kDa ingredient についてN end side をシ-ケンサ- Analyze the decision and compare the 155kD lineup and compare the C The molecular weight of the terminal residue 904 is 100423 and the fragment 100kDa is the component of the C-terminal residue 155kDa. The 35kDa ingredient is a stable and stable adjustment method.

项目成果

桑山 秀人: "平滑筋ミオシン軽鎖リン酸化酵素(MLCK)の単クロ-ン抗体" 生物物理 第29回年会講演予稿集. 31. S82 (1991)

Hideto Kuwayama：“平滑肌肌球蛋白轻链激酶（MLCK）的单克隆抗体”第 29 届生物物理学年会论文集 31. S82（1991）。