平滑筋ミオシン軽鎖リン酸化酵素のアクチン結合と収縮制御

平滑肌肌球蛋白轻链激酶的肌动蛋白结合和收缩控制

• 批准号: 03268201
• 负责人: 桑山 秀人
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03268201/
• 关键词: 平滑筋; ミオシン軽鎖リン酸化酵素; アクトミオシン; ライオトニン; カルシウム

平滑筋のアクチンとミオシンの反応を活性化するCaの作用についてはミオシンフィラメント側であるというミオシンのリン酸化説とアクチンフィラメント側であるというライオトニン(Ln)があり未解決の問題になっている。Ln説における研究課題の一つはアクチンフィラメント側からの制御とは具体的にどのような機構なのかを示す事である。本研究では平滑筋リン酸化酵素(MLCK)の特質の一つであるアクチンとの相互作用に焦点を絞りそれが制御にどのような役割をもつかについて明かにすることを目的とする。トリ筋胃MLCKを抗原にして作成した単クロ-ン抗体はウシ平滑筋のMLCK(155kDa)とも反応しごくわずかであるが155kDa成分による平滑筋アクトミオシン活性化を阻害する。そこでアクチンフィラメント側からの活性化を説明する上で重要と考え155kDa成分における抗体のエピト-プを決定することを試みた。155kDa成分をサ-モライシンにより限定加水分解するとまず130kDaさらに120kDa以下の小さなフラグメントができた。抗体と反応する10kDa以上の高分子量成分としては130kDaのみが認められた。キモトリプシンによる限定分解ではサ-モライシンと同様の反応のほかに抗体と反応する35kDa成分と反応しない120kDa成分への分断反応も生じた。35kDa成分はすぐ分解消失し120kDa成分はさらに100kDa成分に分解した。またトリプシン分解では分子量約60kDaの成分が残った。キモトリプシン断片100kDa成分についてN端側をシ-ケンサ-で分析しすでに決定済みの155kD配列と比較検討したところC末端まで904残基の分子量100423とよく合うので断片100kDa成分は155kDaのC末端まで含んでいると示唆される。35kDa成分について安定な調整法を確立しアクチンと結合するかどうかを調べたい。

The smooth tendon is activated by Ca. The smooth tendon is activated by Ca. The smooth tendon is activated by Ca. The main purpose of this paper is to discuss the research topic, and to discuss the specific mechanism of the research topic. In this study, the characteristics of smooth muscle acidification enzyme (MLCK) were studied. The interaction between MLCK and MLCK was focused on the control of MLCK. Antibodies against MLCK (155kDa) and MLCK(155kDa) were prepared to inhibit the activation of MLCK(155kDa). It is important to determine the activity of the 155kDa component. The 155kDa component can be dissolved in water within a limited amount of time, and the small components below 130kDa but 120kDa can be added. The antibody has a high molecular weight component of 10kDa or more and a molecular weight component of 130kDa or more. The antibody and the anti-tumor component of 35kDa and the anti-tumor component of 120kDa are separated and generated. The 35kDa component was decomposed and the 120kDa component was decomposed and the 100kDa component was decomposed. The molecular weight of the compound is about 60kDa. The 100kDa fragment was analyzed to determine the 155kD alignment of the N-terminal residue and the molecular weight of the C-terminal residue was determined to be 904. The molecular weight of the 100kDa fragment was determined to be 155kDa. 35kDa component stability adjustment method to establish a combination of the two

项目成果

桑山 秀人: "平滑筋ミオシン軽鎖リン酸化酵素(MLCK)の単クロ-ン抗体" 生物物理 第29回年会講演予稿集. 31. S82 (1991)

Hideto Kuwayama：“平滑肌肌球蛋白轻链激酶（MLCK）的单克隆抗体”第 29 届生物物理学年会论文集 31. S82（1991）。