アルツハイマー病脳におけるB/A4の産生とアミロイド線継形成に関する研究

阿尔茨海默病脑中 B/A4 产生和淀粉样蛋白谱系形成的研究

• 批准号: 04268218
• 负责人: 亀谷 富由樹
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Institute of Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04268218/
• 关键词: アルツハイマー病; アミロイド; β1A4; β1A4前駆体タンパク質; ダウン症; アミロイド原性; プロセミング

ADおよびDS脳をリン酸緩衝液でホモゲナイズして得たPB画分、沈殿をリン酸/Triton X-100緩衝液でホモゲナイズして得たPB/T画分、その後の沈殿をさらに8DS/DTT溶液でホモゲナイズして得たSDS画分に分画した。それぞれの画分について、各種タロマトグラフィーをもちいてAPP精製を行った。APPの分析には、APPの各部分に対する抗体、抗T97抗体(APP-695 18-38残基)、抗R98抗体(APP-770 325-337)、抗R36抗体(APP-695 527-540)、抗Z31抗体(APP-695 577-596)、抗R757抗体(β/A4 1-10)、抗R37抗体(APP-695 681-695)を用いた。ADおよびDS脳のPB画分から93-123KDaの分泌型APPを精製した。123KDaおよび105-112KDaは抗T97、抗R98、抗R36抗体と反応し、93-97KDaは抗T97、抗R36抗体と反応し、抗R98抗体とは反応しなかった、また抗Z31、抗757抗体は123、105-112KDaの成分と反応し、抗r37抗体はどの成分とも反応しなかった。これらのAPPの各部に対する抗体の反応性から、93-97KDaの成分はAPP-695に由来する分泌型APPであることが推定された。PB/Tのヘパリン非結合画分からは、抗R37抗体と反応する分子量10-15KDaのC末端断片、またヘパリン結合画分からは105-13KDaの膜結合型APPが得られた。10-15KDaのC末端断片の一部成分(15KDa)は、抗757(β/A4 1-10)抗体と反応した。SDS画分からは、トライトンでは抽出できなかったと考えられる105-130KDaの膜結合型APPが得られた。10-15KDaのC末端断片は抗37抗体と反応し、一部成分は抗757抗体と反応した。また105-130KDaの膜結合型APPは抗R17抗体を除く全ての抗体と反応した。精製した分泌APPのうちAPP-695由来の93-97KDaが抗Z31、抗R757抗体と反応しなかったこと、また、PB/T画分に得られたC末端断片のうち一部成分が抗757抗体と反応したことから、APP-695では、通常のプロセシングとは異なる切断が起き、膜上にアミロイド原性のある断片を生じる可能性を示唆している。

AD/DS/Triton X-100 buffer solution was used to obtain PB/T solution and SDS solution was used to obtain SDS solution. All kinds of equipment, equipment In the APP assay, antibodies against various parts of APP, anti-T97 antibodies (APP-695 residues 18-38), anti-R98 antibodies (APP-770 325-337), anti-R36 antibodies (APP-695 527-540), anti-Z31 antibodies (APP-695 577-596), anti-R757 antibodies (β/A4 1-10), and anti-R37 antibodies (APP-695 681-695) were used. AD, DS, PB, 93-123KDa, secretory APP, refined. Anti-T97, anti-R98, anti-R36 antibodies 105-112KDa, anti-T97, anti-R36 antibodies 93-97KDa, anti-R98 antibodies 123, anti-Z31, anti-757 antibodies 105-112KDa, anti-R37 antibodies Antibodies against all parts of the APP were found to be reactive, and the 93-97kDa component was presumed to be derived from APP-695. PB/T was identified as a membrane-bound APP with a molecular weight of 10-15KDa and an anti-R37 antibody with a molecular weight of 105-13KDa. A portion of the 10-15KDa C-terminal fragment (15KDa) is anti-757(β/A4 1-10) antibody. SDS membrane binding APP of 105-130KDa The 10-15 kDa C-terminal fragment was anti-37 antibody and a part of it was anti-757 antibody. Membrane-bound APP of 105-130kDa contains anti-R17 antibody and anti-R17 antibody. APP-695 was purified and secreted from 93-97KDa. Anti-Z31 and anti-R757 antibodies were obtained from PB/T analysis. Some components of APP-695 were obtained from anti-R757 antibodies and anti-R757 fragments. The possibility of producing anti-R757 antibodies and anti-R757 fragments was shown.

项目成果

Fuyuki Kametani et al: "Secretory form of Auzheimer amyloid precursor protein 695 in human brain laeks β/A4 amyloid immunoreactivety" Biochem. Biophys. Res. Commun.(1993)

Fuyuki Kametani 等人：“人脑中 Auzheimer 淀粉样蛋白前体蛋白 695 具有 β/A4 淀粉样蛋白免疫反应性”Biochem Res。

Hilary Kenrdy et al: "Only Knnitz-inhibitor-containing isoforms of secret Alzheimer amyliod precursor protein show amyloid immunoreactivity" Neurodegeneration. 1. 59-64 (1992)

Hilary Kenrdy 等人：“只有含有 Knnitz 抑制剂的秘密阿尔茨海默淀粉样前体蛋白亚型才显示淀粉样蛋白免疫反应性”神经退行性变。

David Allsop et al: "Secretory derivatives of Alzheines amyloid precursor protein in cerebrospinal fulid and brain: Only Kunitz-containing" Alzheimirs disease: Advances in Clinical and basic research. (1993)

David Allsop 等人：“脑脊液和大脑中阿尔茨海因淀粉样前体蛋白的分泌衍生物：仅含有库尼茨”阿尔茨海默病：临床和基础研究进展。