アルツハイマ-病脳アミロイド形成機序に関する研究

阿尔茨海默病脑淀粉样蛋白形成机制研究

• 批准号: 02240217
• 负责人: 亀谷 富由樹
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Institute of Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02240217/
• 关键词: アルツハイマ-病; アミロイド; アミロイドβ; A4タンパク前駆体; 培養細胞; β; A4タンパク

アルツハイマ-病(AD),Down症脳中ではアミロイドβタンパクを主成分とするアミロイドが広範囲に沈着することが知られている.しかしこのアミロイドβタンパク前駆体(APP)からアミロイドβタンパクにいたる過程については未だに不明である.われわれはこれまでこのアミロイド形成機序の解明を目的として各種培養細胞におけるAPPについての研究を行なってきた.その中の一つ,Buー17(Human glioma)細胞では蛍光抗体法による反応が細胞膜上に顆粒状に観察され,培養上清および細胞膜分画に含まれるAPPを電気泳動およびimmunoblot法を用いて検索した結果では,Buー17細胞には膜結合型APPが存在すると推定された.そこで本研究ではこのBuー17細胞におけるAPPの解析を行った.免疫電顕法をもちいて,Buー17細胞の細胞表面膜上に存在するAPPを検討した.APPの細胞外ドメインに対する抗体はBuー17細胞の細胞表面膜を染色したが,C末端(細胞内ドメイン)に対する抗体は反応しなかった.また,Buー17細胞の表面をbiotin化試薬で標識し,その膜分画からAPPを精製した.精製したAPPはbiotin化されており,さらにAPPの各部に対する抗体と反応した.これらのことからBuー17細胞におけるAPPは膜結合型であることが明かとなった.さらにこのAPPはinhibitor insertドメインを持つことも判明した.これらのことから,細胞には分泌型APPあるいは膜結合型APPを持つものがあり,このことは,分泌型および膜結合型APPが組織特異的に分布し,APPのプロセシングが組織特異的に制御されていることを反映していると考えられた.

The main component of AD,Down syndrome is the main component of AD. The process of the precursor (APP) is unclear. The aim of this study is to clarify the mechanism of cell formation and to study the development of APP in various cultured cells. Among them,Bu-17(Human glioma) cells were detected by light antibody method, granular APP was detected in culture supernatant and cell membrane analysis, and the existence of membrane-bound APP in Bu-17 cells was presumed by immunoblot method. This study was carried out on Bu-17 cells. Immunoelectrochemistry method was used to detect the presence of APP on the cell surface membrane of Bu-17 cells. The antibody against APP was detected on the cell surface membrane of Bu-17 cells. The antibody against APP was detected on the cell surface membrane of Bu-17 cells. The antibody against APP was detected on the C terminal (intracellular). The surface of Bu-17 cells was identified by biotin assay, and APP was refined by membrane analysis. The purified APP is biochemically modified, and the antibodies against all parts of the APP are purified. APP membrane binding type. The APP is an inhibitor insert. The cell secretes APP and membrane-bound APP, and the secreting APP and membrane-bound APP have tissue-specific distributions.

项目成果

Kametani F.et al: "Amyloid β/A4 protein precusor of human glioma cell,Buー17" Neurosci.Lett.

Kametani F.等人：“人神经胶质瘤细胞的淀粉样β/A4蛋白前体，Buー17”Neurosci.Lett。

Kametani F.et al: "Amyloid βーprotein precursor(APP)of cultured cells:secretory and nonーsec^^'retory form of APP" J.Neurol.Sci.97. 43-52 (1990)

Kametani F.等人：“培养细胞的β-淀粉样蛋白前体（APP）：APP的分泌型和非分泌型”J.Neurol.Sci.97（1990）。

Allsop D.et al: "Alzheimer anyloid β/A4 peptide binding.sites and a possible “APPーsecretase" activity assouated with Rat brain cortical membrane" Brain Res.

Allsop D. 等人：“阿尔茨海默病任何样蛋白 β/A4 肽结合位点以及与大鼠脑皮质膜相关的可能的“APP 分泌酶”活性”Brain Res。