ミトコンドリア病におけるDNA診断法の開発と病態の解明

线粒体疾病 DNA 诊断方法的开发和病理学的阐明

• 批准号: 05253221
• 负责人: 宝来 聴
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05253221/
• 关键词: ミトコンドリア脳筋症; ミトコンドリアDNA; 点突然変異; tRNA; PCR; ミスマッチプライマー; ヘテロプラスミィー

ミトコンドリア脳筋症MELASにおいては、tRNA・ロイシン(UUR)遺伝子の塩基番号3243の変異が約80%の患者に、同遺伝子上の塩基番号3271の変異が10%の患者に見い出されている。しかし、約10%の患者はいずれの変異も検出されていない。昨年、白人患者においてND4遺伝子上の塩基番号11084におけるA→G置換が報告された。本研究では、この11084変異に関する検討を行なうとともに、3243および3271の検出されない症例に関して、全tRNA領域の塩基配列の解析を行なった。11084変異:日本人のミトコンドリア脳筋症患者計90例について、この変異をミスマッチプライマーを用いたPCRおよびNheI消化により検討した。その結果、3例のMELAS患者、4例のCPEO患者および分類不明のミトコンドリア脳筋症患者2例にこの変異が観察されたが、いずれもホモプラスミィーの変異であった。さらに正常対照105例を検討した結果、15例(14%)にホモプラスミィーな変異として見い出された。この結果、11084変異は白人においては極めて頻度が低く、日本人では高頻度に存在する正常の多型である可能性が高く、MELASに特異的な変異でないと結論した。3291変異:典型的MELAS症状を呈し、かつ3243および3271変異の検出されない6例に関して全tRNA領域の塩基配列を決定した。その結果、1例において新たにtRNA・ロイシン(UUR)遺伝子上の塩基番号3291におけるT→C変異を見い出した。ミスマッチプライマーを用いたPCR-BamHI消化によって、この変異はヘテロプラスミィーとして見い出されること、および3243あるいは3271変異を有するMELAS患者および正常対照には見い出されないことより、本邦MELAS患者における第3の変異と考えられた。またこの変異はtRNA・ロイシン(UUR)遺伝子における2次構造上では、T〓Cループの最後の塩基で、生物進化上も厳密に保存されていることが明らかとなった。

The patients with MELAS

项目成果

Yoshinaga,H.: "A T-to-G mutation at nucleotide pair 8993 in mitochondrial DNA in a patient with Leigh's syndrome" J.Child Neurol.8. 129-133 (1993)

Yoshinaga,H.：“利氏综合征患者线粒体 DNA 中核苷酸对 8993 处的 T 到 G 突变”J.Child Neurol.8。

Sakuta,R.: "Mitochondrial DNA mutations at nucleotide positions3243 and 3271 in mitochondrial myopathy,encephalpathy,lactic acidosis and stroke-like episodes:A comparative study" J.Neurol.Sci.115. 158-160 (1993)

Sakuta, R.：“线粒体肌病、脑病、乳酸性酸中毒和中风样发作中核苷酸位置 3243 和 3271 的线粒体 DNA 突变：比较研究”J.Neurol.Sci.115。

Umetsu,K.: "Polymorphisms of complementlandC1R subcomponent of C1 in aboriginal Taiwanese populations" Human Biology. (in press).

Umetsu,K.：“台湾原住民群体中 C1 的补体和 C1R 子成分的多态性”人类生物学。

Kawakami,Y.: "Mitochondrial myopathy with progressive decrease in mitochondrial tRNA-Leu(UUR) mutant genomes" Ann.Neurol.(in press).

Kawakami,Y.：“线粒体肌病伴线粒体 tRNA-Leu(UUR) 突变基因组逐渐减少”Ann.Neurol.（出版中）。

宝来,聴: "日本文化の起源,民族学と遺伝学の対話" 講談社, 30 (1993)

Horai, K.：“日本文化的起源，民族学与遗传学之间的对话”讲谈社，30（1993）