脳皮質構造形成の分子機構

脑皮质结构形成的分子机制

• 批准号: 05277221
• 负责人: 平野 伸二
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05277221/
• 关键词: 神経芽細胞の移動; T61; 皮質; 細胞接着分子

本研究は、神経芽細胞の移動に関与するT61抗原の同定およびその機能解析を通じて、脊推動物の脳皮質構造の形成機構を分子レベルで解明することを目的とする。本年度は61抗原に関して以下のような結果を得た。(1)抗原の同定 T61抗体はウエスタンブロッティングでは、440kdのほか270kd、170kd、116kdなどにバンドを検出した。一方、免疫沈降では440kdと340kdのバンドが検出された。従って、これらの共通して見られる440kd分子がT61抗原の有力な候補であると考えられた。分子量とこの抗原の分子から、T61抗原は既知の分子とは異なる新しい細胞接着分子であることが明らかになった。(2)抗原の精製 はじめに、可溶化の条件を免疫沈降法により検討した結果Tween20の場合にのみシグナルが得られることがわかった。これをもとに1%Tween20で10日胚の脳を可溶化し、T61のアフィニディカムで精製を試みたが、440kdに相当する分子の濃縮はみられなかった。これは抗原が非常に変性しやすいため操作の過程で抗体との結合性を失ったのではないかと考えられる。(3)cDNAクローニング 次に、T61を用いてlambdagt11 cDNAライブラリーのスクリーニングを行ない、多数のポジティブクローンを得た。各クローンの部分塩基配列を決定したところ、いくつかは共通の塩基配列を有していた。T61の豊富な発現を考えると、これが目的のクローンである可能性が高い。ノザンブロッティングではこのクローンは神経系で特異的に発現していることがわかった。今後は、このクローンがコードするタンパクに対する抗体を作製し、T61と同様の活性を有するかどうかを検討する予定である。

The purpose of this study is to elucidate the molecular structure of T61 antigen and its function in relation to neuronal cell migration. This year, the following results were obtained: (1)Antigen T61 antibody has been tested at 440kd, 270kd, 116kd and 270kd. A square, immune drop is 440kd and 340kd. The 440kd molecule is a potent candidate for T61 antigen. The molecular weight of T61 antigen is different from that of known molecules. (2)Antigen purification, solubilization conditions, immunoprecipitation method, results, Tween20, and other conditions 1% Tween20, 10% Tween20 This antigen is very sensitive to the operation of the process, antibody binding is lost, and the test results show that (3)cDNA library, T61 library, lambdagt11 library, library Each part of the base arrangement is determined. The probability of T61's rich discovery is high. A special phenomenon in the nervous system occurs in the brain. In the future, the antibody activity of T61 will be discussed.