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減数分裂期組換えに関するクロマチン構造

与减数分裂重组相关的染色质结构

基本信息

批准号：
09269225
负责人：
田中茂生
金额：
$ 1.41万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09269225/
关键词：
組換え遺伝子テロメアクロマチン

项目摘要

減数分裂期組換えのホットスポットYCR47c-YCR48wおよび、ARG4プロモタ-領域では20-30の二重鎖切断の起る場所があるが、それらの全てがヌクレオソームの無いヌクレアーゼ感受性領域に存在することを、塩基対レベルで明らかにした。これらの領域は、野生株でも二重鎖切断の起きない組換え遺伝子の欠失株rad50,mre11およびxrs2においても、ヌクレオソームの無いつまりクロマチン構造をとらない領域であり、クロマチン構造の違いは検出できなかった。この研究を進めている時に、rad50欠失株ではテロメアが短くなるという報告がされた。テロメア領域はテロメアに結合するRap1蛋白質、そのRap1蛋白質とヒストンに結合するSir蛋白質などにより転写活性の抑制されたヘテロクロマチン化していることが知られている。Rad50遺伝子がテロメアの維持に関係していることより、組換え遺伝子がテロメア領域のクロマチン構造の維持に関係している可能性がある。まず、他の組換え遺伝子の欠失株mre11およびxrs2でテロメアの長さを調べた。その結果、両欠失株においてもテロメアが短くなることが分かった。これらの遺伝子は組み換え修復にも関与している、そこで、mre11欠失株にMRE11を発現するプラスミドを導入し、テロメア長の回復を検出することにより、組み換え修復遺伝子の欠損による他の遺伝子の変異によりテロメアが短くなったのではないことを示した。FLAGタグをつけたMRE11を発現するプラスミドを導入し、FLAG-Mre11蛋白質とクロマチンをクロスリンクさせた後、抗FLAG抗体で沈殿したクロマチンよりDNAを精製し、テロメア領域のプライマーを用いたPCRでMre11蛋白質がテロメア領域のクロマチンに結合していることを明らかにした。私はURA3遺伝子のクロマチン構造を塩基対レベルで解いた、現在、URA3遺伝子がテロメア領域に導入された菌株を用い、そのクロマチン構造を解析している。つぎに、組み換え遺伝子の変異をその菌株に導入しURA3遺伝子のクロマチン構造変化を解析する計画である。

During the period of mitosis, there are significant changes in the field of YCR47c-YCR48w, ARG4, and ARG4. The field is 20-30 years old. There are no significant changes in the field of sensitivity. Both the field and the wild plant were cut off, and the missing rad50,mre11 plant, the xrs2 plant, the missing plant, the missing plant After the completion of the study, the short-term reports of rad50-deficient plants were not reported in the first half of the year. In the field, the combination of Rap1 protein, Rap1 protein, Sir protein, Sir protein, protein and protein. The Rad50 system is responsible for maintaining the performance of the system. It is necessary to maintain the possibility of maintaining the performance of the system. The mutant and other plants were isolated from the mre11 plant, the xrs2 plant, the mutant plant, and the plant. The results showed that the missing plants were divided into two groups. This is the first time that the missing plant of mre11 has been found to be in the market. The missing plant of MRE11 has been shown to show that the missing plant is not in use, and that the missing plant of MRE11 is not in use. The anti-FLAG antibody was detected in the serum of FLAG, MRE11, DNA, PCR, Mre11 protein, PCR, protein, protein and protein. The private URA3 system is used to make the information system. At present, the URA3 system is used in the field of bacterial infection, and the system is used. The bacteria were introduced into the URA3 virus, and then analyzed and analyzed.