新しい機能をもつキメラ型のミオシンの検索

寻找具有新功能的嵌合肌球蛋白

• 批准号: 09279227
• 负责人: 大石 昇
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09279227/
• 关键词: 分子モーター; ミオシン; PCR; 分子生物学

ディクチオ型細胞性粘菌から新しい機能をもつキメラ型のミオシンの検索を試みた。はじめに、キメラ型のミオシンIII、IX、Xに近縁のミオシンを、これらのファミリー間で相同性が高く他のファミリー間では相同性が低い3個所の短い共通な配列をプライマーとしてゲノムDNAからPCR行い、検索を試みたが、新しいミオシンは発見できなかった。次に、モータードメイン内の共通配列である、Pループ、およびスイッチ2と呼ばれる領域について、キメラ型のミオシンIII、IX、Xの塩基配列をもとにプライマーを作成し、ゲノムDNAを鋳型としてPCRを行ったところ、既知のミオシン2のほかにこれまで報告の無い配列を含むミオシンに類似した配列が1つ確認できた。その配列には、キメラ型のミオシンIII、IX、Xと同様に、保存性の低いループ領域でのアミノ酸の挿入が多数見られ、またPループからスイッチ2までの配列を他のミオシンと比較すると、これまで知られているどのミオシンファミリーとも相同性が低いことがわかった。また、増殖期の細胞性粘菌から作成したcDNAを鋳型として、同様にPCRを行ったところ、この遺伝子の産物と思われるバンドが確認されたので、偽遺伝子ではないことがわかった。この新しいミオシンが、キメラ型である可能性は高いと思われ、遺伝子の全長の決定と、ノックアウト作成による機能の確認の実験が進行中である。さらに、特定のミオシンの、モータードメイン内の共通配列をもとにしたPCRによる検索が、新しいミオシンの検索に有効であることが確認できたので、プライマーのデザインを変えることにより、他の新しいミオシンの発見が期待される。

A new type of cellular myxomycete is used to test the function of a new type of myxomycete The common arrangement of the three types of DNA in the sequence III, IX and X is similar to that in the sequence III, IX and X. The common arrangement of the three types of DNA in the sequence III, IX and X is similar to that in the sequence III, IX and X. The common arrangement of the three types of DNA in the sequence III, IX and X is similar to that in the sequence III, IX and X. The common arrangement of the three types of DNA in the sequence III, IX and X is similar to that in the sequence III. The common arrangement of the three types of DNA in the sequence III, IX and X is similar to that in the sequence III. The common arrangement in the secondary, middle, middle In the case of the arrangement, the type III, IX, X, and X are identical, and the preservation is low. In the case of the arrangement, most of the acids are added to the list. In the case of the arrangement, other elements are added to the list. In the case of the arrangement, the identity is low. In the early stages of reproduction, the cellular fungi were produced in the form of cDNA fragments, which were identified by PCR. The possibility of determining the length of the gene is high, and the confirmation of the function is in progress. In addition, the common arrangement in the specific case, the detection of PCR, the detection of the new case, the confirmation of the common arrangement in the specific case, the detection of PCR, the detection of the new case, the detection of the new case, the detection of PCR, the detection of PCR, the detection of PCR.