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カルパイン-ノックアウトマウスにおける脳虚血の影響

钙蛋白酶敲除小鼠脑缺血的影响

基本信息

批准号：
16639015
负责人：
渡辺高志
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16639015/
关键词：
脳虚血カルパインマウス

项目摘要

新潟大学では、研究目的を達成するためには、どのような遺伝子の機能欠損マウスおよびトランスジェニックマウスを作成するのが良いのか、遺伝子が決定された場合、どのようなデザインのconditional targeting vectorが脳の解析の実際を考えた場合に最適であるのか、さらにconditional targeting vectorがES細胞において正しく機能してconditional targetingがきちんと起こるのか否か、などの疑問に答えを出すための調査をおこなった。これらの検討の結果、μ-Calpain遺伝子であるCapn1、あるいはm-Calpain遺伝子であるCapn2を個別にノックアウトするよりも、μ-およびm-Calpainとヘテロ2量体を形成するCalpain small subunitの遺伝子Capn4を脳で特異的にノックアウトするのが、μ-およびm-Calpainを一挙に機能喪失させることができることより、最適と考えられ、そのためには、loxP配列を組み込んだCapn4遺伝子用のconditional targeting vectorをノックインしたマウスの作成、および、成人脳において特異的に発現する遺伝子のプロモーターにCre recombinase遺伝子をつないだトランスジェニックマウスの入手あるいは自前の作成が必要との結論を得た。なお、調査した範囲内では、Capn4遺伝子を脳で特異的にノックアウトするマウスの実験系は、未だ世界のどの研究室においても確立されていないことが明らかになった。鳥取大学では、上記のことについて新潟大学の里方教授と打ち合わせをおこなった。また、マウス脳虚血モデルとしては、頚動脈に糸を誘導し虚血を作製することが可能でありすぐれていると考えられた。Calpainの免疫組織化学、またCalpainの活性の指標となるフォドリンの分解を定量化することが可能であることが判明した。以上、なお解決されなければならない点もあるが、本研究の遂行が十分可能であると結論された。

Niigata University has achieved its research objectives. It is the most suitable for the situation where the conditional targeting vector of the target vector is analyzed. The conditional targeting vector for ES cells has the function of conditional targeting to answer questions. The results of this research include: μ-Calpain subunit Capn1, μ-m-Calpain subunit Capn 2, μ-m-Calpain subunit Capn 4, μ-m-Calpain subunit Capn 4, μ-m-Calpain subunit Capn1, μ-m-Calpain subunit Capn2, μ-m-Calpain subunit Capn 4, μ-m-Calpain subunit Capn 1, μ-m-Calpain subunit Capn4, μ-m-Calpain subunit Capn 1, μ-m-Calpain subunit Capn4, μ-m-Calpain subunit Capn4, μ-m The conditional targeting vector for loxP alignment is composed of two components, namely, the conditional targeting vector for Capn4 gene and the conditional targeting vector for Cre recombinase gene. In the investigation, the scope of the investigation is different from that of the investigation. The investigation is different from that of the investigation. Tottori University The blood of the heart is not in the heart. Immunohistochemistry of Calpain and the quantification of Calpain activity The above conclusions are very likely to be solved.