白血病発症におけるE3ユビキチン・リガーゼの機能解析とその臨床応用

E3泛素连接酶在白血病发生发展中的功能分析及其临床应用

• 批准号: 17590075
• 负责人: 武藤 章弘
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Hoshi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17590075/
• 关键词: 白血病; PML-RARα; ユビキチン・リガーゼ; 薬学; 転写因子; 癌; シグナル伝達

急性前骨髄球性白血病(APL)はオールトランスレチノイン酸による寛解導入療法が導入されて以来、治療成績が飛躍的に向上している。その一方で一部の症例においてレチノイン酸が無効な症例が存在する。急性前骨髄球性白血病の90%以上の症例において認められるPML-IURαはレチノイン酸によりアミノ末端が切断され分化に必要な遺伝発現の抑制が解除されることが報告されたこと、PML-RARαはコリプレッサー複合体と結合することにより転写を拍制することが知られているため、その詳細な機序を検討した。はじめに、免疫沈降法により、APL細胞株NB4細胞のPML-RARα蛋白とN-CoRの結合を確認した。次に、レチノイド応答配列(RARE)を有するRARβのプロモーター領域を組み込んだルシフェラーゼベクターを作製した。PML-RARαおよび5'領域を欠損させたPML-RARαΔPML-RARα発現プラスミドをルシフェラーゼベクターとともにHEK293T細胞に強制発現したところ、PML-RARα導入細胞ではRARE応答配列の転写活性の抑制が認められたが、ΔPML-RARα導入細胞では転写活性の抑制が解除された。さらに、N-CoRの蛋白修飾についてPML-RARα導入細炮とΔPML-RARα導入細胞を比較したところ、N-CoRのユビキチン化の変化は見られなかったが、PML-RARα細胞ではΔPML-RARα導入細胞と比較してN-CoRがより強くSUMO化されていることがわかった。以上より、PML-RARαはそれ自身に結合したコリプレッサーのうちN-CoRをユビキチン化、SUMO化するE3ユビキチン・リガーゼとして働き、RARE転写活性を抑制すること、レチノイン酸によりPML-RARαのアミノ末端が切断されることにより、そのE3ユビキチン・リガーゼとしての機能が阻害され、転写活性が回復することが示唆された。

Acute leukaemia of sex of bone marrow and the ball before (APL) は オ ー ル ト ラ ン ス レ チ ノ イ ン acid に よ る understanding solution import therapy が import さ れ て, treatment result が leap に し up since て い る. Youdaoplaceholder0 そ one side で one case of <s:1> にお てレチノ てレチノ <s:1> acid が no effect な case of が present する. Acute leukaemia of sex of bone marrow and the ball before の more than 90% of the cases の に お い て recognize め ら れ る PML (IUR alpha は レ チ ノ イ ン acid に よ り ア ミ ノ end が cut さ れ differentiation に necessary な heritage 伝 発 の inhibit が now remove さ れ る こ と が report さ れ た こ と, PML (RAR alpha は コ リ プ レ ッ サ ー complex と combining す る こ と に よ り planning write を system Youdaoplaceholder0 な とが know られて るため るため, そ <s:1> detailed な sequence を検 discuss た. は じ め に, immune sink に よ り, APL cell line NB4 cells の PML (RAR alpha protein と N - CoR の combining を confirm し た. に, レ チ ノ イ ド 応 a match column (RARE) を す る RAR beta の プ ロ モ ー タ ー field を group み 込 ん だ ル シ フ ェ ラ ー ゼ ベ ク タ ー を cropping し た. PML (RAR alpha お よ び 5 'field を owe loss さ せ た PML (RAR alpha Δ PML (RAR alpha 発 now プ ラ ス ミ ド を ル シ フ ェ ラ ー ゼ ベ ク タ ー と と も に HEK293T cells に forced 発 now し た と こ ろ, PML (RAR alpha import cell で は RARE 応 a match column の planning write inhibition が の recognize め ら れ た が, Δ When ML-rar α is introduced into cells, で 転 転 write activity <s:1> inhibition が is relieved された. さ ら に, N - CoR の protein modification に つ い て PML (RAR alpha imported fine cannon と Δ PML (RAR alpha import cell を compare し た と こ ろ, N - CoR の ユ ビ キ チ ン change の variations change は see ら れ な か っ た が, PML (RAR alpha cells で は Δ PML (RAR alpha import cell と compare し て N - CoR が よ り strong く SU Moization されて されて る とがわ とがわ った った. Above よ り, PML (RAR alpha は そ れ its own に し た コ リ プ レ ッ サ ー の う ち N - CoR を ユ ビ キ チ ン, SUMO す る E3 ユ ビ キ チ ン · リ ガ ー ゼ と し て 働 き, RARE planning write inhibition す を る こ と, レ チ ノ イ ン acid に よ り PML (RAR alpha の ア ミ ノ end が cut さ れ る こ と に よ り, そ の E3 ユ ビ キ チ ン · リ ガ ー ゼ と し て の function が resistance against さ れ reply, activity planning write が す る こ と が in stopping さ れ た.