血小板膜糖蛋白GPIaの構造と機能に関する研究

血小板膜糖蛋白GPIA的结构与功能研究

• 批准号: 01637006
• 负责人: 渡辺 清明
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01637006/
• 关键词: 血小板膜糖蛋白; GpIa; IIa複合体; コラーゲン粘着; 巨核球; 血小板; 内皮細胞

本年度は、血小板の他にヒト臍帯静脈内皮細胞および巨核球celllineMEGO1(各大斉藤眞彦教授寄贈)において、Gpla/IIa複分体が発現しているか否かを検討した。また、Gplaに対するモノクローナル抗体を用いて、血小板、MEG01のコラーゲンに対する接着能の検討を行った。(1)内皮細胞のGpla/IIaの合成:metabolic label(^<35>S-メチオニンを用いた)した、内皮細胞に、GpIaのモノクローナル抗体(12F1,Dr Pisbul変贈)でimmumisolation を行うと、分子量140、118KD(非還元F)および155、135KD(還元F)の二つの蛋白がisolateされた。(2)MEG01において、同様にmetabolic label したものをIysateにし、12F1とA-1A5C GPIIaに対するモノクローナル抗体Dr Hemico寄贈)を用いてimmunobo lationを行った。その結果、MEG01をPMAで刺激後にGPIaが、刺激前後にGpIIaがisolateされた。Flow cyAometoyでも同様な効果が得られた。(3)血小板およびMEG01のコラーゲンへの粘着に対するGpIaモノクローナル抗体の影響:6F1(GpIaに対するモノクローナル抗体.Dr Coller寄贈)は、血小板のコラーゲンへの接着(Mg^nイオン存在下)を明らかに抑制した。またMEG01では、PMA刺激後のみに明らかにコラーゲン接着が(コラーゲンfyrcI〜Vで)認められた。この接着は6F1にて抑制された。以上よりGpIa/IIa複合体は血小板のみならず巨核球でもPMA利活後に膜上に発現され、内皮細胞でも膜に発現している事が判った。GpIa/IIa複合体が、血小板、巨核球においてもコラーゲン接着に関与している事が、この社会体のモノクローナル抗体を用いた事実上判明した。

This year, we will investigate whether platelet and other endothelial cells in umbilical vein and megakaryocyte celllineMEGO1 (a gift from Prof. Makihiko Ohita) can be detected. The study was conducted on the use of antibodies, platelets and MEG01 in the treatment of cancer. (1)Gpla/IIa synthesis in endothelial cells:Metabolic label(^<35>S-), endothelial cells, GpIa (2)MEG01, Metabolic label, Iysate, 12F1, A-1A5C GPIIa, Antigen, Dr Hemico, and Immunobo. MEG01: GPIa after stimulation, GpIIa before and after stimulation The Flow cymetoy is the same as the flow cymetoy. (3)Effect of GpIa antibody on platelet adhesion to MEG01: 6F1 (GpIa antibody to MEG01. Gift from Dr Coller) is a clear inhibitor of platelet adhesion to MEG01 in the presence of Mg. MEG01, PMA, and then (C), FyrcI ~ V). This is followed by 6F1 suppression. GpIa/IIa complex was found in the membrane of platelets and endothelial cells after PMA activation. GpIa/IIa complex, platelets, megakaryocytes, and then related to the use of antibodies in the community.

项目成果

Kamata T.,Y.Kaweai,Y.Ikeda,K.Watanabe et al: "Expcression of Platelet GPIa/IIa Complex on human mejakajobldst cell line:MEGー01." Thranbosis and Haemostasis. 62. 260 (1989)

Kamata T.、Y. Kaweai、Y. Ikeda、K. Watanabe 等人：“血小板 GPIa/IIa 复合物在人 mejakajobldst 细胞系上的表达：MEGー01。” 62. 260 (1989)。

Y.Kawai,M.Handa,Y.Ikeda,K.Watanabe et al.: "Role of Membrane Glyco Proteins in the Intraction of Blood Platels with the Vessel wall" Acta Haematologica Japonica. 52. 68-77 (1989)

Y.Kawai，M.Handa，Y.Ikeda，K.Watanabe 等：“膜糖蛋白在血板与血管壁牵引中的作用”Acta Haematologica Japonica。