哺乳類の卵および胚の成熟分化過程の研究:単一卵の定量的解析

哺乳动物卵和胚胎的成熟和分化过程研究：单个卵的定量分析

• 批准号: 01640503
• 负责人: 加藤 尚彦
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01640503/
• 关键词: 未受構卵; 卵胞卵; 初期胚; 卵胚培養; エネルギ-代謝; デオキシグルコ-ス; 性ホルモン; ヘクソキナ-ゼ

マウスとラットの単一卵と単一初期胚を培養し、独自に開発した超微量分析法を用いて、卵胞卵から胞胚までのエネルギ-代謝関連酵素活性の測定と、内在性のglucoseとglucose 6-phospahte(G6P)の濃度測定および、2-deoxyglucose(DG)の取り込みと2-deoxyglucose-6-phosphate(DG6P)生成能の分析を行った。その結果、1)卵胞卵が排卵されて受精するまで、未受精卵ではエネルギ-代謝関連酵素群のうち解糖系酸素(malate dehydrogense)とTCAサイクルの酵素(malate dehydrogense)の活性は著しく増加するが、五単糖シャント系酵素(G6P,6-phosphogluconate dehydrogenase)の活性は、本来の高い値から急激に減少した。2)ヒトの未受精卵でも、解糖系酵素の活性は低かった。3)単一卵のglucose濃度は、卵胞卵から受精直前の未受精卵まで1/10に減少し、受精を契機として跳躍的に6倍に、また胞胚まで受精1細胞卵の4.5倍に指数関数的に増加した。4)G6P濃度はglucose濃度の1/10以下であり、卵細卵から胞胚まで連続的にほぼ3倍まで指数関数的に増加した。5)未受精卵自身はDGを取り込むことが出来ず、卵丘細胞に囲まれた卵(卵丘細胞卵複合体)にDGを取り込ませると、卵丘細胞が取り込んだDGを、卵細胞が卵丘細胞とのgap junctionを通じて取り込む。6)受精を契機として、卵の細胞膜にglucose carrier(またはtransporter)が発現し、胚の成熱と共に取り込み活性は急激に増加する。7)桑実胚にはfast trappig pool(急速にDGを取り込むが、そのDGは代謝されない)とmetabolic pool(ゆっくりDGを取り込み代謝する)の2つのglucoseの取り込みpoolがある、などの事実が明らかになった。

The activity of enzyme was determined by glucose glucose 6-phospahte (G6P) assay, and 2-deoxyglucose (DG) assay was performed by 2-deoxyglucose (DG) assay. The results are as follows: 1) oocyte ovulation, fertilization, unfertilized ovulation, unfertilized eggs, unfertilized oocytes, oocytes, ovulation, fertilized eggs, unfertilized oocytes, ovulation, fertilized eggs, unfertilized oocytes, ovulation, fertilized eggs, unfertilized eggs, unfertili 2) the activity of glycolytic enzymes in unfertilized eggs and glycolytic enzymes was low. 3) the glucose of one egg, the number of unfertilized eggs before fertilization is 10 times less, the jump rate of fertilization machine is 6 times, and the number of embryos fertilized is 4.5 times higher than that of unfertilized eggs. 4) G6P degree

项目成果

加藤尚彦: "単一ニュ-ロシンの生化学 神経生化学:上" 共立出版, 12(442 459) (1990)

加藤直彦：“单个神经素的生物化学神经生物化学：第 1 部分”Kyoritsu Shuppan，12(442 459) (1990)

Akira Akabayashi: "One-step and two-step fluorometric assay methods for general aminotransferases using glutamate dehydrogenase" Analytical Biochemistry. 182. 129-135 (1989)

Akira Akabayashi：“使用谷氨酸脱氢酶的一般转氨酶的一步和两步荧光测定方法”分析生物化学。

Osamu Tsutusumi: "Studies of hexokinase acticity in human and mouse oocyte" American Jouranl of Obstetrics and Gynecology. (1990)

Osamu Tsutusumi：“人类和小鼠卵母细胞己糖激酶活性的研究”《美国妇产科杂志》。

Masahiko Mizuno: "Role of prostaglan dins in egg implantation In Advances in gyne cological enolecrinology" Parthenon Publishing Group, 7(433 439) (1989)

Masahiko Mizuno：“前列腺素在卵子着床中的作用 In Advances in gyne cological enolecrinology” Parthenon Publishing Group，7(433 439) (1989)

Yoshiya L.Murashima: "γ-Aminobutyric acid system in developing and degenerating mouse retinas" Journal of Neurochemistry. (1990)

Yoshiya L.Murashima：“小鼠视网膜发育和退化中的γ-氨基丁酸系统”《神经化学杂志》（1990）。