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膜電位感受性色素-Ca指示薬-光散乱の組み合せによる脳シナプス過程の光学的測定

结合膜电压敏感染料、Ca 指示剂和光散射对大脑突触过程进行光学测量

基本信息

批准号：
01659504
负责人：
神野耕太郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

個体発生の初期過程における中枢神経系のシナプス伝達系の形成過程の追跡は中枢神経系の基本的機構を解析するうえで重要な戦略となる得る。そこで、われわれは、膜電位感受性色素を用いたニュ-ロン活動の光学的超多チャネル同的記録法を用いて、従来の電気生理学的手法による測定が困難であった発生初期の脳幹のシナプス活動の光学的測定を行い、それを記録することに成功した。メロシアニン・ロ-ダニン系膜電位感受性色素NK2761をポテンシャル・プロ-ブとして用い、ふ卵8日の鶏胚脳幹で迷走神経線維の電気刺激によって誘発されるニュ-ロン応答を色素の吸光シグナルとして128ケ所から同時記録した。さらに記録部位を移動することにより、脳幹内の最高1000ケ所以上から光学的シグナルを記録し、そのマッピングをおこなった。記録された光学的シグナルは二相性を示し、刺激電流パルスから数msec以内に立ち上がるスパイク状の時間経過の速いシグナルと、それに続いて1秒以上持続する時間経過の遅いシグナルが記録された。この二種のシグナルはともに膜電位変化にともなう色素特有の波長依存性を示すが、遅いシグナルは連続刺激に対して徐々に減衰する特徴があり、低Ca^<2+>液やCd^2やMn^<2+>を含む液中で遅いシグナルのみが選択的に抑制されることなどから、速いシグナルは刺激によって直接誘発されたニュ-ロンの活動電位に対応し、遅いシグナルは刺激で興奮したニュ-ロンからシナプスを介して伝達された興奮性シナプス電位(EPSP)であることが明らかになった。そのEPSPの伝達物質は各種のブロッカ-を用いた薬理学的検索でグルタミン酸であることが同定された。さらにEPSPの発現する部位は脳幹の刺激側のやや外側、横断面でみると背側面近くに限局しており、この部分に孤束核に対応すると考えられる感覚性の神経核が機能的に形成されつつあることが明らかにされた。

In the early stages of life, the central nervous system is responsible for the formation of the central nervous system. The basic mechanism is to analyze the important aspects of the central nervous system. The photosensitive pigments of electrophoretic sensors, electrodes, and membranes were measured by the same recording method of optical activity optics. The methods of computer physiology were used to determine the difficulties in the early days of life. The NK2761-sensitive pigment of Mesangial electroporation was detected by radioimmunoassay, and the results were recorded at the same time as recorded at the same time during the 8th day of gestation. The recording part of the system moves the information system, the optical system record of more than 1000 yuan in the hotel, and the information system of the system. Record the two-phase performance indicator of the optical cycle, the emergency response time within the msec of the stimulus current cycle, and the cycle time of more than 1 second during the cycle time. The characteristic wavelength dependence of the pigments in the thin films, the wave length dependence of the pigments in the films, the characteristics of the wave length dependence of the pigments in the thin films, the characteristics of the wave length dependence of the pigments in the thin films, the low Ca ^ & lt;2+> liquid CD ^ 2 mn ^ & lt;2+&gt. This includes the suppression of the active potential in the liquid, the activation of the active potential, the activation of the mobile potential, the activation of the electrical potential, and the activation of the electrical potential. All kinds of EPSP products are used to determine the same level of information. The location of the EPSP is sensitive to stimulation, the cross-sectional area is close to the local area, and part of the nucleus tractus solitarius is sensitive to the formation of the nuclear power system.