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脳虚血モデルにおける海馬単一神経細胞内イオン濃度変動の光学的測定

脑缺血模型中单个海马神经元内离子浓度波动的光学测量

基本信息

批准号：
08780793
负责人：
中村健
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、海馬スライスin vitro脳虚血モデルにおいて虚血負荷をかけた場合に海馬CA1ニューロンで生じる細胞内カルシウム及びナトリウム濃度上昇を単一神経細胞レベルでとらえた。1.細胞内カルシウム濃度測定に関して以下の成果が得られた。単一神経細胞内での測定のための基礎的検討として、従来の方法により以下のことを行った。(1)組織染色法やCA1ニューロン欠損標本を用いてマクロイメージング法によるCA1領域でのCa上昇が、神経細胞内に由来することを明らかにした。(2)親和性の異なる複数のカルシウム指示薬によりCA1ニューロンの樹状突起における特異的上昇を明確化した。この結果をふまえて海馬単一神経細胞内へCa指示薬を注入し、虚血刺激中に生じる細胞内カルシウム濃度変動の測定を行った。その結果、以下のことが明らかとなった。(3)虚血負荷により、数分の潜時を以って海馬CA1ニューロンで細胞内カルシウム濃度が上昇した。(4)細胞体だけでなく樹状突起部でも上昇した。2.細胞内ナトリウム濃度変動に関して以下の成果が得られた。(1)虚血負荷により、数分の潜時を以って海馬CA1ニューロンで細胞内ナトリウム濃度が上昇した。(2)虚血負荷による細胞内ナトリウム濃度上昇はCA1領域に特異的なものであった。以上の結果より、短時間の虚血負荷により海馬CA1神経細胞においてイオンホメオスタシスが破綻を来たし、このことが後の遅発性神経細胞死を誘発する要因となることが示唆された。

In this study, hippocampal CA1 cells were cultured in vitro, and their intracellular concentrations increased in vitro. 1. The results of intracellular concentration determination were as follows: A basic approach to the measurement of intracellular activity in the brain is described below. (1)Tissue staining method: CA1, CA 2, CA 3, CA 4, CA 5, CA 6, CA 7, CA 8, CA 9, CA 9, (2)Affinity and diversity of clusters are indicated by CA1 and dendrites are specifically elevated. The results showed that the intracellular Ca indicator was injected into hippocampus, and the intracellular Ca concentration was measured during hypoglycemic stimulation. The result is that the following is the same as the result. (3)The intracellular concentration of CA1 in hippocampus increased with the increase of blood load and latency. (4)The cell body is divided into tree-like protrusions. 2. Changes in intracellular concentrations are associated with the following results: (1)The intracellular concentration of CA1 in hippocampus increased with the increase of blood load and latency. (2)The concentration of CA1 in the cells increased due to the deficiency of blood load. The above results indicate that short-term hypoglycemic stress in hippocampal CA1 neurons is the main cause of apoptosis.