权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

カボチャのアスコルビン酸酸化酵素遺伝子の組織特異的発現とその制御機構の解明

南瓜抗坏血酸氧化酶基因组织特异性表达及其调控机制的阐明

基本信息

批准号：
02261214
负责人：
江坂宗春
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

カボチャ果実組織からゲノムDNAを抽出し、アスコルビン酸酸化酵素cDNAをプラ-ブとしたサザンブロットをおこなった結果、アスコルビン酸酸化酵素遺伝子のハプロイドゲノムあたりのコピ-数はシングルコピ-と推定した。アスコルビン酸酸化酵素cDNAをプロ-ブとしたノ-ザンブロット法によりカボチャ細胞におけるアスコルビン酸酸化酵素の種々の生産調節が転写レベルで制御されているのかどうかを調べた。カボチャ果実組織からのカルス化にともないアスコルビン酸酸化酵素活性およびタンパク質が急激に増大するが、ノ-ザンブロットの結果からアスコルビン酸酸化酵素mRNAもカルス化にともない増大することがわかった。ホルモンである2、4ーDをぬくとアスコルビン酸酸化酵素mRNAは増大しないこと、同じカボチャの分泌性酵素であるキチナ-ゼは2、4ーDあるなしにかかわらず増大することなどから、アスコルビン酸酸化酵素は2、4ーDにより酸導されるものと思われる。すなわち、アスコルビン酸酸化酵素遺伝子の転写がオ-キシンにより制御されている可能性が示された。一般に、アスコルビン酸酸化酵素はウリ科植物の果実組織に多量に発現する酵素とされていた。しかし、ノ-ザンブロットの結果から成長中の葉組織にも有意なアスコルビン酸酸化酵素mRNAが認められた。一方、カボチャ種子中にはアスコルビン酸酸化酵素mRNAは認められなかったが、吸水発茅にともなって、急激にアスコルビン酸酸化酵素mRNAが蓄積されていった。これらの結果から、アスコルビン酸酸化酵素の生産量が細胞の成長や増殖と相関しているように思われる。アスコルビン酸酸化酵素が細胞壁に局在する酵素であることから、アスコルビン酸酸化酵素が細胞壁の生長になんらかの関与をしているのかもしれない。現在、アスコルビン酸酸化酵素のゲノム遺伝子のクロ-ニングを試みており、今後、さらにアスコルビン酸酸化酵素伝子の発現調節の機構を遺伝子レベルで明らかにしていきたい。

カボチャ Fruit tissue からゲノムDNA を extraction し, アスコルビン acid acid enzyme cDNA をプラ-ブとしたサザンブロットをThe result of おこなった, アスコルビン acid acidifying enzyme 缝子のハプロイドゲノムあたりのコピ-number はシングルコピ-とESTIMATE した.アスコルビン acidification enzyme cDNA をプロ-ブとしたノ-ザンブロット法によりカボチャcell におけるアスコルビンルビンの Kind of 々の production regulation が転WRITE レベルでcontrol されているのかどうかを Adjustment べた.カボチャ国产からのカルス化にともないアスコルビンAcid acidifying enzyme activity およびタンパクquality が sharp irritation に Increase large するが, ノ-ザンブロットのRESULTS からアスコルビン acidifying enzyme MRNAもカルス化にともない大することがわかった.ホルモンである2, 4ーDをぬくとアスコルビン acid acidifying enzyme mRN Aは嗗大しないこと、同じカボチャの secreted enzyme であるキチナ-ゼは2、4ーDあるなしにかかわらず尗大することなどから、アスコルビン acid acidifying enzyme は 2, 4ーD により acid lead されるものと思われる.すなわち, アスコルビン acid acidifying enzyme 伝子の転WRITE がオ-キシンによりcontrol されている POSSIBILITY が SHOW された. In general, a large amount of に発present する enzyme とされていた is used in the fruit tissue of plants of the アスコルビン acid acidifying enzyme.しかし、ノ-ザンブロットのRESULTSからThe growing leaf tissue にも is intended to なアスコルビンacidification enzyme mRNA められた. One side, カはアスコルビン acidifying enzyme mRNA in カボチャseeds, Water-absorbing 発草にともなって, acute にアスコルビン acidifying enzyme mRNA が accumulation されていった.これらのRESULTS から、アスコルビン acidification enzyme の production volume がの growth や proliferation と related しているように思われる.アスコルビン acid acidifying enzyme, cell wall enzyme, アスコルThe acidification enzyme of ビン acidification enzyme is used for growth of cell wall and をしているのかもしれない. Now, アスコルビン acid acidifying enzyme のゲノム伝子のクロ-ニングをtest みており, from now on, さらThe にアスコルビン acid acidifying enzyme 伝子の発existing regulatory mechanism の伝子レベルで明らかにしていきたい.